詳細(xì)介紹
熒光定量PCR試劑盒:
Real Time PCR EasyTM-SYBR Green I試劑盒提供的2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR是一種使用SYBR Green I進(jìn)行Real Time PCR擴(kuò)增反應(yīng)的全新預(yù)混系統(tǒng),,能大幅度提高產(chǎn)物特異性和反應(yīng)靈敏度。同時(shí),提供ROX作為內(nèi)參染料,。該試劑盒的熒光強(qiáng)度為同類產(chǎn)品的3-5倍,,能更靈敏的、更直觀的反應(yīng)目的模板DNA的濃度,。產(chǎn)品僅用于科研
2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR包含本公司*的熱啟動(dòng)Foregene Taq DNAPolymerase,,該酶相對(duì)于普通Taq酶具有擴(kuò)增效率高、特異性擴(kuò)增能力強(qiáng),、錯(cuò)配率低等優(yōu)點(diǎn),。用于熒光定量PCR反應(yīng)可減少非特異性擴(kuò)增,提高PCR的準(zhǔn)確性,。
中文名稱:豹源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:詳見說明書
貨號(hào):GOY-M4669
規(guī)格:50T
產(chǎn)品特性: 高特異性:本產(chǎn)品采用熱啟動(dòng) DNA 聚合酶,,90℃以上 2min 后具有擴(kuò)增活性,可大大提高 PCR 產(chǎn)物的特 異性,。 靈敏度:本產(chǎn)品包含的優(yōu)化的緩沖液可檢測(cè)低拷貝數(shù)的模板,,且重復(fù)性好。 高適用性:本產(chǎn)品可適用于任意熒光定量 PCR 儀,。
試劑盒內(nèi)容:
Store at -20°C
2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR:包括特別改造的熱啟動(dòng) Taq DNAPolymerase,、MgCl2、優(yōu)化配比的 dNTPs 和 SYBR Green I,、反應(yīng)緩沖液,、PCR反應(yīng)增強(qiáng)劑、優(yōu)化劑以及穩(wěn)定劑等,。PCR 反應(yīng)時(shí),,只需將適當(dāng)?shù)牧呀饣旌弦骸⒁?、DNase-ddH2O添加到2×Real PCR EasyTM Mix-SYBR中即可用于PCR反應(yīng),。
ROX Reference Dye:一般用于 ABI、Stratagene 等公司的 Real Time PCR 擴(kuò)增儀上,,用于調(diào)整 PCR 加樣誤差所引起的 PCR 管與管之的差異,。不同儀器所需ROX Reference Dye 濃度不同,用戶可以根據(jù)儀器的推薦濃度添加,。DNase-Free ddH2O:超純水,,用于 PCR 反應(yīng)。
試劑盒應(yīng)用
熒光定量PCR進(jìn)行模板定量分析,。
常規(guī)PCR擴(kuò)增,。
樣品要求及注意事項(xiàng):
1、 如果提供實(shí)驗(yàn)材料,,實(shí)驗(yàn)材料必須保證新鮮,,請(qǐng)您采樣后立刻放入液氮中速凍或加入樣穩(wěn)定劑,,并用干冰運(yùn)輸。
2,、 如果樣品可以用Trigol法提總RNA ,,也可以將樣品研磨后放在 Trigol中,動(dòng)植物組織 : 50~100mg/mlTrigol,,貼壁細(xì)胞:10cm2/mlTrigol,,懸浮細(xì)胞:5×106動(dòng)植物,酵母細(xì)胞或細(xì)菌細(xì)胞10×107/mlTrigol,。
3,、 如果提供RNA或cDNA我們要對(duì)您提供的材料進(jìn)行評(píng)估。
4,、 實(shí)時(shí)熒光定量PCR服務(wù)您一定要提供樣品及要擴(kuò)增基因的詳細(xì)信息,。熒光定量PCR原理:
熒光定量PCR早稱TaqMan PCR,,后來也叫Real-Time PCR,,是美國(guó)PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實(shí)現(xiàn)其定量功能的,。其原理:隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行,,PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì),,熒光信號(hào)強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過一個(gè)循環(huán),,收集一個(gè)熒光強(qiáng)度信號(hào),,這樣我們就可以通過熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測(cè)產(chǎn)物量的變化,從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖,。
一般而言,,熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個(gè)階段:熒光背景信號(hào)階段,,熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺(tái)期,。在熒光背景信號(hào)階段,擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋,,無法判斷產(chǎn)物量的變化,。而在平臺(tái)期,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加,,PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系,,根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段,, PCR產(chǎn)物量的對(duì)數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系,,我們可以選擇在這個(gè)階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便,,在實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個(gè)非常重要的概念:熒光閾值和 CT值,。
以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
氨蝶呤二基酯C10H14O人單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA Kit
氨蝶呤妥布霉素酰胺C12H24O2人單純皰疹病抗原-1(HSV-Ag1)ELISA Kit
基 6-[基-β-D-葡萄糖醛酸酯]麥考酚酯C12H20O2人單純皰疹?、蛐涂贵wIgM(HSVⅡ-Ab)ELISA Kit
基4,7,8,9-四-O-酰-2-硫代-N-酰-...C23H26O8人單純皰疹病Ⅱ型抗體IgG(HSVⅡ-Ab)ELISA Kit
基4-羥基-2-基-2H-1,2-苯并噻嗪-3-羧...C15H18O2人單純皰疹?、裥?HSVⅠ)抗體(IgM)ELISA Kit
基4-羥基-2H-1,2-苯并噻嗪-3-羧酸鹽 1,...C26H28O14人單純皰疹?、裥?HSVⅠ)抗體(IgG)ELISA Kit
基4-羥基-3-氧基肉桂酸酯C15H11ClO7人單純皰疹病Ⅰ+Ⅱ型(HSVⅠ+Ⅱ)抗體(IgM)ELISA Kit
基6-[基-2,3,4-tri-O-?;?β-D...C16H13ClO6人單純皰疹?、?Ⅱ型(HSVⅠ+Ⅱ)抗體(IgG)ELISA Kit
基利魯唑C17H15ClO7人帶3蛋白(Band3)ELISA Kit
基麥考酚酯(環(huán)氧樹脂雜質(zhì)E)C16H13ClO7人大內(nèi)皮素(Big ET-1)ELISA Kit
硫咪唑硫代-β-D-葡萄糖苷酸C21H21ClO12人存活素抗體/生存蛋白(Surv)ELISA Kit
酰環(huán)沙星C21H21ClO12人脆性組氨酸三聯(lián)體(FHIT)ELISA Kit
氧芐啶乳酸鹽C20H19ClO11人催乳素誘導(dǎo)蛋白(PIP)ELISA KitALPHA-DELTA-UA-[1->3]-GALNAC-4S SODIUM SALT 黃芪黃酮
豹源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒Aloe-emodinChicken SIGLEC12 (Sialic Acid Binding Ig Like Lectin 12) ELISA Kit
ALPHA-DELTA-UA-[1->3]-GALNAC-6S SODIUM SALT 司盤60
AloinChicken /nNOS (Nitric Oxide Synthase 1, Neuronal) ELISA Kit
OKADAIC ACID 槐角苷
TriclosanChicken GC (Glucagon) ELISA Kit
Ferric acetylacetonate 槐定堿
Chloroplatinic acid hydrateChicken CTSK (Cathepsin K) ELISA Kit
tris(2-pyridylmethyl)amine 番茄紅素
DibroMochloroMethaneChicken COL5α2 (Collagen Type V Alpha 2) ELISA Kit
Tris(2-(2-methoxyethoxy)ethyl)amine 丹寧酸
2-Methoxy-4-morpholinobenzenediazonium chloride zinc chloride double saltChicken sAC (Soluble Adenylate Cyclase) ELISA Kit
相對(duì)定量簡(jiǎn)介:
分析方法: ①雙標(biāo)曲法 ②2 - △Ct ③2 - △△Ct ④Pfaffi法
①雙標(biāo)準(zhǔn)曲線法簡(jiǎn)介
公式:
優(yōu)點(diǎn):分析簡(jiǎn)單,實(shí)驗(yàn)優(yōu)化簡(jiǎn)單產(chǎn)品僅用于科研
缺點(diǎn):對(duì)每一個(gè)基因,,每一輪實(shí)驗(yàn)都必需做標(biāo)準(zhǔn)曲線,;必需有固定的標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線;這些標(biāo)準(zhǔn)品并不代表樣品擴(kuò)增的真實(shí)狀態(tài)應(yīng)用:基因表達(dá)調(diào)控研究中用與*的兩種相對(duì)定量方法之一,。