產(chǎn)品屬性:
中文名稱:GlyT1抑制劑(LY2365109 hydrochloride)
英文名稱:LY2365109 hydrochloride
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
LY2365109是一個強的和選擇性的GlyT1抑制劑,,IC50是15.8nM. 注:本品僅可用于科研實驗,,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1779796-27-8 純度:98.83% 分子量:421.91 儲存條件:-20℃,,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核,、染色體以及基因表達(dá)的研究,;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究,;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控,;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡),;
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化,;
⑧細(xì)胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1,、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化,;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5,、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h,;
6、用PBS沖洗3次,,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
Enterococcus faeciumHalomonas neptunia
毛栓孔菌Halomonas neptunia
疣梗青霉Halomonas neptunia
淺藍(lán)灰曲霉Halomonas neptunia
糙皮側(cè)耳Halomonas neptunia
*薔薇放線孢Halomonas meridiana
熱淀粉鏈霉菌Halomonas meridiana
柱孢犁頭霉Halomonas meridiana
釀酒酵母Halomonas aquamarina
蘋果雙殼菌Halomonas aquamarina
炭黑曲霉Halobacillus trueperi
鴨疫里氏桿菌Micrococcus antarcticus
米曲霉Virgibacillus pantothenticus
漢遜德巴酵母Marinococcus halophilus
蘇云金芽胞桿菌Kocuria polaris
大腸桿菌Idiomarina seosinensis
豬促生長激釋放激(GHRH)免疫試劑盒ARM重復(fù)X連鎖蛋白ARMCX3抗體人血血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)大戟因子L1
豬促腎上腺皮質(zhì)激(ACTH)免疫試劑盒ARM重復(fù)X連鎖蛋白ARMCX1抗體人血血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)大薊苷
豬促卵泡(FSH)免疫試劑盒ARM重復(fù)X連鎖蛋白ARMCX2抗體人神經(jīng)營養(yǎng)因子4(NT-4)酰
豬促甲狀腺釋放激(TRH)免疫試劑盒自噬相關(guān)蛋白10抗體人神經(jīng)營養(yǎng)因子4(NT-4)大麥芽堿
GlyT1抑制劑(LY2365109 hydrochloride)SCF 英文名稱: 干細(xì)胞生長因子抗體 0.1ml
EDAR 英文名稱: 壞死因子受體超家族成員EDAR抗體 0.2ml
分泌素受體抗體 Anti-Secretin receptor 0.2ml
Anti-phospho-Tau protein (Ser396)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化微管相關(guān)蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-MEF2C(Thr20) 磷酸化肌細(xì)胞增強因子2C抗體 規(guī)格 0.1ml
IRS-4 胰島素受體底物-4(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
操作規(guī)程
1,、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,,需根據(jù)細(xì)胞的大小,,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2,、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物,。
3、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間,。
4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5,、每孔加50μL 1× MTT 溶液,,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜,。
6,、吸出上清液,,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻。
7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8,、結(jié)果分析
a,、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,,無細(xì)胞),,各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b,、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)