商品介紹:
S0859能可逆的高親和性NBC抑制劑,,能抑制NBC介導(dǎo)的pH(i)恢復(fù),,Ki為1.7_mu_M,*抑制則需30_mu_M。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1019331-10-2 純度:98.0% 分子量:530.04 儲存條件:-20℃,,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用,。 |
以下是細胞生物學(xué)試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
NBC抑制劑(S0859) | S0859 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水),。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞,。
對于貼壁細胞,,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,,離心收集細胞,共洗滌兩次,。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml,。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,,室溫避光孵育15min,。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測),。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細胞,、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置,。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析,,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),,PI為縱坐標(biāo),。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,,顯微鏡下觀察,。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán),。喪失細胞膜完整性的細胞,,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán),。
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%,。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%,;二氧化碳,,5%。 溫度:37℃,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng),。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,,1000RPM,,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
肌侵蛋白(MTPN)ELISA Kit英文名稱:MTPN ELISA Kit磷化β-連環(huán)蛋白/β-連環(huán)/β鏈接抗體包裝5g
肌腱蛋白X(TNX)ELISA Kit英文名稱:TNX ELISA Kit磷化β-連環(huán)蛋白/β-連環(huán)/β鏈接抗體包裝5MG
肌肌激(CKM)ELISA Kit英文名稱:CKM ELISA Kit磷化β-連環(huán)蛋白/β-連環(huán)/β鏈接抗體包裝1g
肌紅蛋白(MYO)ELISA Kit英文名稱:MYO ELISA Kit磷化β-連環(huán)蛋白/β-連環(huán)/β鏈接抗體包裝5g
肌苷三磷(ITPA)ELISA Kit英文名稱:ITPA ELISA KitβA3/A1-crystallin蛋白抗體包裝25g
肌鈣蛋白T()ELISA Kit英文名稱:TNELISA KitγS-crystallin蛋白抗體包裝100g
肌動蛋白相關(guān)蛋白2/3復(fù)合體亞基4(ARPC4)ELISA Kit英文名稱:ARPC4 ELISA Kit1號染色體開放閱讀框85抗體包裝25g
饑餓(GHRL)ELISA Kit英文名稱:GHRL ELISA Kit1號染色體開放閱讀框87抗體包裝5g
回腸脂肪結(jié)合蛋白(FABP6)ELISA Kit英文名稱:FABP6 ELISA Kit1號染色體開放閱讀框95抗體包裝25g
黃體激(LH)ELISA Kit英文名稱:LH ELISA Kit補體C1S鏈多肽抗體包裝5g
脫氫(XDH)ELISA Kit英文名稱:XDH ELISA Kit20號染色體開放閱讀框106抗體包裝50g
緩激肽(BK)ELISA Kit英文名稱:BK ELISA Kit20號染色體開放閱讀框107抗體包裝100g
環(huán)氧化合物解4(EPHX4)ELISA Kit英文名稱:EPHX4 ELISA Kit20號染色體開放閱讀框117抗體包裝25g
環(huán)加氧2(PTGS2)ELISA Kit英文名稱:PTGS2 ELISA Kit20號染色體開放閱讀框118抗體包裝100g
環(huán)加氧1(PTGS1)ELISA Kit英文名稱:PTGS1 ELISA Kit20號染色體開放閱讀框144抗體包裝25g
曲霉Aspergillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品整合α2試劑盒乙酰紫草;Acetylshikonin
型副傷寒沙門菌Salmonella│paratyphi A 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%,USP34,BR,可用于培養(yǎng)整合A5試劑盒異丹葉大黃;Isorhapontige
花津浦芽孢桿菌Bacillus│hwajinpoensis 質(zhì)量規(guī)格:>97%,USP34,BR真胰島試劑盒7-乙基喜樹堿;7-Ethylcampt
NBC抑制劑(S0859)透明質(zhì)/玻璃抗體(R型)人參皂苷Rh1(標(biāo)準(zhǔn)品) Mevastatin
肝生長因子激活物抑制劑抗體(R型)人參皂苷Rh2 Mevastatin
HA tag標(biāo)簽單克抗體(S型)人參皂3(標(biāo)準(zhǔn)品) 6-Aminopenicillanic acid
血紅抗體(S型)人參皂苷Rh2(標(biāo)準(zhǔn)品) Asparaginase
戊型肝炎病抗體(S型)原人參三 N-Carbobenzyloxy-L-alanine
神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白1抗體(±)-柚皮(標(biāo)準(zhǔn)品) Z-Gln-OH
神經(jīng)膠質(zhì)生長因子/神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白β抗體1,2,3,4,6-O-沒食子酰葡萄糖(標(biāo)準(zhǔn)品) CBZ-L-Gly
組三聚體核苷結(jié)合蛋白1抗體1,2-O-Dilinoleoyl-3-O-β-D-g... Proparacaine HCl
組蛋白去乙?;?/span>3抗體1,3-二咖啡??鼘?標(biāo)準(zhǔn)品) Z-Ser-OH