以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
p38抑制劑(SB-366791) | SB-366791 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg | 1~3天 |
商品介紹:
SCIO-469是p38選擇性的ATP競(jìng)爭(zhēng)抑制劑,,IC50值是9nM. 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號(hào):472981-92-3 純度:98.01% 分子量:287.74 儲(chǔ)存條件:-20℃,,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用,。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%,。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%;二氧化碳,,5%,。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3)凍存液:90%血清,,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,,液氮儲(chǔ)存,。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM,,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水),。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,,胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),,加入細(xì)胞培養(yǎng)液,,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),,500-1000g離心5min收集細(xì)胞,。
3) 收集細(xì)胞后,,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,,共洗滌兩次,。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml,。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,,輕輕混勻,,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞,、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置,。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),,PI為縱坐標(biāo),。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察,。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI,。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,,細(xì)胞核顯示紅色,,膜上有綠色光環(huán)。
桿菌CD339/Jagged1抗原Anti-GPR146 Antibody人纖連蛋白(FN)
鹽索氏菌即刻早期基因(一種原癌基因)抗原Anti-GPR146 Antibody人纖連蛋白(FN)
植物乳桿菌CD3 epsilon(抗原)Anti-GPR149 Antibody人纖連蛋白(FN)
產(chǎn)氣莢膜梭菌 C型霉偶聯(lián)牛血清白蛋白Anti-GPR150 Antibody人纖連蛋白(FN)
類布氏乳桿菌霉偶聯(lián)雞卵白蛋白蛋白Anti-GPR149 Antibody人NOGO-A抗體(Nogo-A Ab)
球孢白僵菌干擾誘導(dǎo)T趨化因子抗原Anti-GPR150 Antibody人NOGO-A抗體(Nogo-A Ab)
土壤球菌組織蛋白GAnti-GPR151 Antibody人抗組織轉(zhuǎn)谷??贵wIgA(tTG-IgA)
大腸埃希氏菌(大腸桿菌)CD68(多肽抗原)Anti-GPR151 Antibody人抗組織轉(zhuǎn)谷??贵wIgA(tTG-IgA)
腸沙門氏菌腸亞種乙酰轉(zhuǎn)移(抗原)Anti-GPR152 Antibody人抗存活抗體/生存蛋白(Surv)
植物乳桿菌高密度脂蛋白受體/清道夫受體抗原Anti-GPR152 Antibody人抗存活抗體/生存蛋白(Surv)
芽孢桿菌柯薩奇病A16型聚蛋白3DAnti-GPR153 Antibody人粒巨噬集落激因子抗體(GM-CSF Ab)
平菇畸胎瘤衍化生長(zhǎng)因子抗原(表皮生長(zhǎng)因子相關(guān)肽)C端Anti-GPR153 Antibody人粒巨噬集落激因子抗體(GM-CSF Ab)
異色擬盤多毛孢CD33抗原(人)Anti-GPR157 Antibody人抗肌聯(lián)蛋白抗體(TTN)
巨大香菇肌鈣集蛋白/收鈣Anti-GPR158 Antibody人抗肌聯(lián)蛋白抗體(TTN)
*櫻桃鏈格孢角蛋白19抗原Anti-GPR156 Antibody人抗突觸前膜抗體(PsmAb)
云南鞘單胞菌己烯雌偶聯(lián)牛血清白蛋白Anti-GPR156 Antibody人抗突觸前膜抗體(PsmAb)
紅細(xì)胞血影腦蛋白β2/spectrinβIII抗體干酪乳桿菌干酪亞種人正常結(jié)腸上皮細(xì)胞
腦磺基轉(zhuǎn)移樣蛋白4A1抗體巴氏醋桿菌巴氏亞種人Ph+急淋白血病細(xì)胞系
突觸結(jié)合蛋白14抗體瑞士乳桿菌人腹膜間皮細(xì)胞
內(nèi)質(zhì)網(wǎng)脂質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)蛋白2抗體乳鏈球菌小鼠胰島瘤胰島a細(xì)胞
p38抑制劑(SB-366791)三亞布勒擔(dān)子酵母 三苯基氧化膦
矩圓黑盤孢 N-甲基吩甲基硫酸鹽
假單胞 羅丹寧
根瘤 辛可寧
生癌腸桿 脂質(zhì)體2000
枯草芽孢桿 鈹試劑II
解淀粉芽孢桿 鈹試劑Ⅰ
弗蘭克氏 2-并噻唑
大腸埃希氏桿 順式六氫苯二甲酸酐
巨大芽胞桿 十二烯基丁二酸酐
蘑菇輪枝孢 S-乙酰巰基丁二酸酐
緊密帚枝霉 角鯊烯
樟疫霉 黃蓍樹膠粉
傳染性支氣管炎病 植物凝膠
黃綠鏈霉 氣溶膠OT