公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核,、染色體以及基因表達(dá)的研究,;
②生物膜與細(xì)胞器的研究,;
③細(xì)胞骨架體系的研究,;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控,;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控,;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡),;
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:CREBBP/EP300抑制劑(SGC-CBP30)
英文名稱:SGC-CBP30
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
SGC-CBP30是強(qiáng)效的CREBBP/EP300抑制劑,,無(wú)細(xì)胞試驗(yàn)中IC50分別為21~69nM和38nM,。對(duì)CBP的選擇性分別是對(duì)BRD4(1)和BRD4(2)選擇性的40倍和250倍。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號(hào):1613695-14-9 純度:99.19% 分子量:509.04 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用,。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1,、無(wú)菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化,;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5,、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二,、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜,;
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h,;
6、用PBS沖洗3次,,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1,、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,,需根據(jù)細(xì)胞的大小,,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2,、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物,。
3、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間,。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。
5,、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),,使MTT 還原為甲臜,。
6、吸出上清液,,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻。
7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8,、結(jié)果分析
a,、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,,無(wú)細(xì)胞),,各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值,。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
發(fā)酵畢赤酵母磷化絲裂原活化蛋白激磷-1抗體Human MGAT5B ELISA Kit膜聯(lián)蛋白Ⅶ(ANX-Ⅶ)
海生紅球菌磷化絲裂原活化蛋白激磷-1抗體Human MGEA5(Protein O-GlcNAcase) ELISA Kit膜聯(lián)蛋白Ⅵ(ANX-Ⅵ)
pGEX-5X-3絲/蘇蛋白激MLK3抗體Human KLK8(Kallikrein-8) ELISA Kit膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)
貝倫格葡萄座腔菌梨生?;土谆z/蘇蛋白激MLK3抗體Human mGluR1 ELISA Kit膜聯(lián)蛋白Ⅳ(ANX-Ⅳ)
Enterobacter ludwigii Hoffmann有絲分裂原和應(yīng)激活化型蛋白激1抗體Human mGluR2 ELISA Kit膜聯(lián)蛋白Ⅲ(ANX-Ⅲ)
黃曲霉磷化有絲分裂原和應(yīng)激活化型蛋白激1抗體Human MEX3C ELISA Kit膜聯(lián)蛋白Ⅱ(ANX-Ⅱ)
婁徹鏈霉菌磷化有絲分裂原和應(yīng)激活化型蛋白激1抗體Human MFF ELISA Kit膜聯(lián)蛋白Ⅰ(ANX-Ⅰ)
海洋桿菌磷化有絲分裂原和應(yīng)激活化型蛋白激1抗體Human METT10D ELISA Kit膜結(jié)合型IgM(mIgM)
糖多孢菌磷化有絲分裂原和應(yīng)激活化型蛋白激1抗體Human MFN1 ELISA Kit膜攻擊復(fù)合物(MAC)
地衣芽孢桿菌肌球蛋白磷抗體Human METTL11A ELISA Kit膜輔蛋白(MCP/CD46)
博戈里亞假菌絲酵母磷化肌球蛋白磷抗體Human METTL5 ELISA Kit繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激(MIS/AMH)
變異鏈霉菌磷化肌球蛋白磷抗體Human METTL3 ELISA Kit繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激(AMH)
微桿菌屬磷化肌球蛋白磷抗體Human MIER3 ELISA Kit苗條受體(LR/Ob-R)
林生畢赤酵母磷化肌球蛋白磷抗體Human METTL4 ELISA Kit免疫抑制性蛋白(IAP)
茯苓Z磷化肝生長(zhǎng)因子受體(原癌基因)抗體Human CALB2(Calretinin) ELISA Kit免疫球蛋白重鏈可變區(qū)(IgHV)
木豆根瘤菌絲裂原活化蛋白激MKK6抗體Human MINA ELISA Kit免疫球蛋白重鏈(IgH)
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR鹽黃連堿
豬霍亂沙門(mén)氏菌Salmonella│choleraesuis 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR黃連堿
刺孢青霉Penicillium│spinulosum Thom 質(zhì)量規(guī)格:>98%,用于蛋白分析小檗堿
CREBBP/EP300抑制劑(SGC-CBP30)魯氏接合酵母 2--6-甲苯N末端C型利鈉肽前體Elisa
日本曲霉 基氧鎓四氟酸鹽總膽固Elisa
豬丹絲 酮基磷酸二甲酯低密度脂蛋白Elisa
大腸桿屬 5--1,10-菲咯啉高密度脂蛋白Elisa
聚生殼 1-苯基-2-炔-1-磷酸二酯4Elisa
球孢白僵 1,1,2-基-1H-苯并[e]磷酸二酯4Elisa
枯草芽孢桿 異丁酸葉酯磷酸二酯5Elisa
四川散斑殼 1-溴-4-n-丁基苯KI-67抗原Elisa
居真細(xì) 7-甲氧基-2-萘滿酮增殖核抗原Elisa
球孢白僵 2,3,4,6-四芐基-D-吡喃葡萄糖煙酰腺嘌呤二核苷酸磷酸Elisa
枯草芽孢桿 1--9,,10-二苯乙炔基蒽3-硝基酪氨酸Elisa
南假單胞 2-苯肼鹽酸鹽絲蟲(chóng)抗體Elisa
新疆鹽地桿 1,10-二溴癸烷ω干擾Elisa
凝結(jié)芽胞桿 三-O-乙酰-D-半乳糖烯ε干擾Elisa
印度洋斯塔普氏 三(2-氨基乙基)基質(zhì)衍生因子1Elisa