詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
CW-069 | 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg | 1~3天 |
商品介紹:
CW-069是微管動力蛋白HSET變構抑制劑,,比對KSP的抑制性高,。 注:本品僅可用于科研實驗,,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號:1594094-64-0 純度:98.0% 分子量:500.33 儲存條件:-20℃,,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
公司產品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),,90%,;優(yōu)質胎牛血清,,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%,;二氧化碳,5%,。 溫度:37℃,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存,。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細胞密度,。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng),。
對于懸浮細胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,,常溫條件下離心5分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,,500-1000g離心5min收集細胞,。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,,胰酶消化時間不宜過長或過短,,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,,500-1000g離心5min收集細胞,。
3) 收集細胞后,,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,,共洗滌兩次,。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,,使細胞濃度達到1×106 cell/ml,。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,,輕輕混勻,,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經(jīng)凋亡誘導的正常細胞,、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,,正常細胞組可作為熒光補償調節(jié)去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),,F(xiàn)ITC為橫坐標,PI為縱坐標,。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光,。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察,。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI,。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,,細胞核顯示紅色,,膜上有綠色光環(huán)。
嗜冷桿菌大鼠抗凝血受體Anti-POLR1C Antibody人心肌營養(yǎng)1(CT-1)
枯草芽孢桿菌人鐵蛋白Anti-POLR2E Antibody人心肌營養(yǎng)1(CT-1)
釀酒酵母小鼠血小板活化因子Anti-POLR2J Antibody人銅藍蛋白(CP/CER)
匍枝根霉原變種人微量轉鐵蛋白Anti-POLR2J Antibody人銅藍蛋白(CP/CER)
豇豆慢生根瘤菌大鼠凝血受體Anti-POLR3B Antibody人熱休克蛋白90(HSP-90)
香菇小鼠橫紋肌輔肌動蛋白αAnti-POLR3A Antibody人熱休克蛋白90(HSP-90)
紅細菌屬小鼠肌球蛋白Anti-POLR3A Antibody人熱休克蛋白70(HSP-70)
釀酒酵母大鼠心肌肌鈣蛋白ⅠAnti-POLR3D Antibody人熱休克蛋白70(HSP-70)
硬水黃桿菌人基質金屬蛋白組織抑制因子1Anti-POLR3D Antibody人熱休克蛋白40(HSP-40)
大腸埃希菌人髓鞘堿性蛋白抗體Anti-POLR3D Antibody人熱休克蛋白40(HSP-40)
米曲霉大鼠磷肌3激Anti-POLR3E Antibody人熱休克蛋白20(HSP-20)
土壤黃桿菌小鼠主要組織相容性復合體Ⅰ類Anti-POLR3E Antibody人熱休克蛋白20(HSP-20)
擬青霉大鼠蛋白激BAnti-POLR3G Antibody人肌球蛋白(MYS)
香菇小鼠GATA結合蛋白4Anti-POLR3H Antibody人肌球蛋白(MYS)
釀酒酵母人組織多肽抗原Anti-POLR3H Antibody人凝溶膠蛋白(GS)
燼灰鏈霉菌人肺癌標志物Anti-POM121 Antibody人凝溶膠蛋白(GS)
細胞骨架相關蛋白2抗體摩洛哥芽孢桿菌乙鈣不動桿菌
敏感性鉀離子通道蛋白抗體滑子蘑蠟狀芽孢桿菌
血小板跨膜反應蛋白1抗體黃白側耳表皮葡萄球菌
腫瘤蛋白P53誘導蛋白11抗體銳齒櫟蛙眼摩氏摩根氏菌摩根亞種
微管動力蛋白HSET變構抑制劑(CW-069)尤氏泰勒蟲(定西株) N-芴甲氧羰基-N'-甲苯磺?;?L-精
希瓦氏屬 叔丁氧羰基-甲苯磺?;?精
雞腿菇 雙(2-氧代-3-惡唑烷基)酰
嗜堿芽孢桿 DL-高胱
蒼白鹽八疊球 DL-高半胱硫酸內酯鹽酸鹽
塔賓曲霉 ε-聚賴
玉蕈(真姬菇) 半胱氨酰甘
樟疫霉 L-胱硫
被孢屬 L-類胱
煙曲霉 S-腺甘蛋
大腸埃希 S-腺甘基蛋
惡臭假單胞 順式-D-羥脯
枯草芽孢桿 2-氨基-1-苯乙
天格爾黃桿 L-谷鹽
樹舌靈芝(可定) 甘叔丁酯鹽酸鹽