以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
商品介紹:
LY-411575是高效的γ-secretase抑制劑,,能夠抑制Aβ40蛋白的產(chǎn)生,,其IC50值為0.078nM/0.082nM(基于膜/細(xì)胞),,同時(shí)抑制Notch分裂,IC50值為0.39nM,。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):209984-57-6 純度:98.71% 分子式:C??H??F?N?O? 分子量:479.48 儲(chǔ)存條件:-20℃,,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),,90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%,。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%,;二氧化碳,,5%。 溫度:37℃,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3)凍存液:90%血清,,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,,液氮儲(chǔ)存,。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM,,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水),。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,,胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),,加入細(xì)胞培養(yǎng)液,,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),,500-1000g離心5min收集細(xì)胞,。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,,離心收集細(xì)胞,,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,,重懸細(xì)胞,,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,,輕輕混勻,,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞,、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),,F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo),。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),,活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI,。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán),。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,,膜上有綠色光環(huán),。
地衣芽胞桿菌組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移MOF抗體Human NOC4L ELISA Kit去加壓/1-去基-8-右旋-精加壓(dDAVP)ELISA Kit
后藤假絲酵母間質(zhì)蛋白抗體Human NOB1 ELISA Kit趨化因子受體3(CCR3)ELISA Kit
大腸桿菌肌球蛋白輕鏈3抗體Human NOD2(Nucleotide-binding oligomerization domain-containing protein 2) ELISA Kit趨化因子配體17(CXCL17)ELISA Kit
詹氏桿菌多藥耐藥蛋白/P-糖蛋白抗體Human HSP90B1(Endoplasmin) ELISA Kit趨化因子CXCL16(CXCL16)ELISA Kit
釀酒酵母同源結(jié)構(gòu)蛋白1抗體Human NOC4L ELISA Kit趨化因子C-C-基元配體1(CCL1)ELISA Kit
鏈格孢增殖誘導(dǎo)蛋白5/肺癌相關(guān)蛋白10抗體Human NINJ2 (Ninjurin-2) ELISA Kit趨化因子26(CCL26)ELISA Kit
厚垣孢普可尼亞菌肌鈀蛋白抗體Human NIPBL ELISA Kit趨化因子2(CXCL2)ELISA Kit
露濕漆斑菌肌管相關(guān)蛋白2抗體Human HP(Haptoglobin) ELISA Kit趨化因子(fractalkine/CX3CL1)ELISA Kit
乳片球菌基質(zhì)金屬蛋白18/19抗體Human NKRF ELISA Kit趨化因子(FK)ELISA Kit
不吸水鏈霉菌增殖相關(guān)蛋白MAGOH抗體Human NKIRAS2 ELISA Kit趨化因子(CCL5/RANTES)ELISA Kit
芽孢桿菌絲裂原活化蛋白激激激4抗體Human NKTR ELISA Kit驅(qū)動(dòng)蛋白家族成員27(KIF27)ELISA Kit
貝倫格葡萄座腔菌神經(jīng)分化因子6抗體Human NEDD4 ELISA Kit清道夫受體類B成員1(SCARB1)ELISA Kit
白被黑蛋巢同源盒蛋白Meis2抗體Human PTHLH(PaRathyroid hormone-related protein) ELISA Kit清道夫受體B(SRB/CD36)ELISA Kit
根瘤菌Meteorin神經(jīng)膠質(zhì)分化調(diào)節(jié)蛋白抗體Human NLRP2 ELISA Kit輕鏈鐵蛋白(L-ferritin)ELISA Kit
嗜乳桿菌棕櫚酰化膜蛋白5抗體Human NEDD4L ELISA Kit青少年2型血色沉著癥/幼年型血色病相關(guān)蛋白2(HFE2)ELISA Kit
中慢生華癸根瘤菌腦蛋白239抗體Human NFIB ELISA Kit親環(huán)蛋白A(PPIA/CYPA)ELISA Kit
百合科Colletotrichum│liliacearum (Westend.) Duke 質(zhì)量規(guī)格:用于蛋白質(zhì)組分析,,用于高效液相色譜標(biāo)記,,熒光染料,用于質(zhì)譜的衍生化試劑積雪草苷
: =ATCC33326=BCRC13358=CBS306.61=DSM43838=IF資源名稱: 玫瑰小雙孢菌玫瑰亞種 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC)D-(+)-木糖
異常漢遜酵母Hansenula│anomala 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)異鼠李
γ-secretase抑制劑(LY-411575)DKK3 抑癌蛋白DKK3抗體酯 AR,,98%
DMT1 金屬離子轉(zhuǎn)運(yùn)體1抗體酯 CP,,97%
DMBT1 抑癌因抗體酯 standard for GC, ≥99.5% (GC)
Dnmt1 Dnmt1蛋白抗體丁香酚 99%
Dnmt3a DNA轉(zhuǎn)移-3α抗體丁香酚 ≥98%, FCC, Kosher, FG
Dnmt3 Beta DNA轉(zhuǎn)移-3β抗體丁香酚 >99.5%(GC)
DNA PKcs DNA依賴蛋白激催化亞抗體丁香酚 natural, ≥98%, FCC
DOK1 D酪氨激衰減蛋白1抗體月桂酯 99%