產(chǎn)品屬性:
中文名稱:ASK1抑制劑(ASK1-IN-1)
英文名稱:ASK1-IN-1
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
ASK1-IN-1是一種凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1(ASK1)抑制劑,,詳細(xì)信息參考WO2016025474A1中的化合物4,。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號(hào):1262041-49-5 純度:99.33% 分子量:411.46 儲(chǔ)存條件:-20℃,,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用,。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核,、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究,;
③細(xì)胞骨架體系的研究,;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控,;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡),;
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一,、分離與培養(yǎng):
1,、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大小,;
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5,、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜,;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h,;
6,、用PBS沖洗3次,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
鴨疫里氏桿菌Micrococcus antarcticus
溶藻細(xì)菌Bacillus idriensis
日本根霉Bacillus indicus
產(chǎn)核青霉Bacillus muralis
棉花立枯菌Bacillus muralis
水稻漢納酵母Marinobacter salsuginis
泰坦尼克鹽單胞菌Marinobacter salsuginis
白黃側(cè)耳(姬菇)Bacillus idriensis
埃里溫鏈霉菌Marinobacter salsuginis
堅(jiān)強(qiáng)芽胞桿菌Marinobacter salsuginis
樹(shù)舌5-3Marinobacter salsuginis
球毛殼菌Marinobacter salsuginis
畢赤酵母菌屬Marinobacter segnicrescens
層出鐮孢原變種Marinobacter hydrocarbonoclasticus
球擬酵母屬Marinobacter hydrocarbonoclasticus
副豬嗜血桿菌Marinobacter pelagius
豬單核趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)免疫試劑盒干擾誘導(dǎo)蛋白AIM2抗體人P選擇(P-Selectin/CD62P/GMP140)大黃葡萄糖苷
豬催乳(PRL)免疫試劑盒水通道蛋白-2抗體人P選擇(P-Selectin/CD62P/GMP140)大黃
豬催產(chǎn)(OT)免疫試劑盒腫瘤抑制基因ABI2/精酪蛋白激結(jié)合蛋白抗體人血血小板衍生生長(zhǎng)因子AB(PDGF-AB)大黃-8-O-β-D-葡萄糖苷
豬促性腺激抑制激(GnIH)免疫試劑盒ADP核糖基化因子樣11抗體人血血小板衍生生長(zhǎng)因子AB(PDGF-AB)大戟二烯
ASK1抑制劑(ASK1-IN-1)SDF1 英文名稱: 基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1抗體 0.1ml
eIF6 英文名稱: β4整合素結(jié)合蛋白抗體 0.1ml
血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子抗體 Anti-VEGF 0.1ml
Anti-Trx/FITC 熒光素標(biāo)記硫氧還蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-IL-7Ra(Tyr449) 磷酸化白細(xì)胞介素-7受體a抗體 規(guī)格 0.1ml
CaMK2b(calcium/calmodulin-dependent protein kinase II beita) 鈣/鈣調(diào)素依賴蛋白激酶2b抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定),。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2,、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3,、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,,在37℃孵育4小時(shí),,使MTT 還原為甲臜。
6,、吸出上清液,,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻,。
7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片),。
8,、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD,。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值,。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b,、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)