LRRK2抑制劑(PF-06447475)公司*的產(chǎn)品：Anti-GAPDH /FITC 熒光素標(biāo)記3-磷酸甘油醛脫氫酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-NPY1R/FITC 熒光素標(biāo)記神經(jīng)肽Y1受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh BPIL2 殺菌/通透性增加蛋白

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：LRRK2抑制劑(PF-06447475)

英文名稱：PF-06447475

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核,、染色體以及基因表達(dá)的研究,；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究,；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控,；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡),；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化,；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1,、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，最后將1mm3左右大小,；

2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s,，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s,，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化；

4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,，1200r/min 離心10min，棄去上清,，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；

5,、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基,，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；

二、免疫熒光鑒定：

1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min,；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min,；

4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,；

5,、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h；

6,、用PBS沖洗3次,，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。

馬泰勒蟲（青海剛察株）成熟T淋巴增殖蛋白1抗體Human NR2C1(Nuclear receptor subfamily 2 group C member 1) ELISA Kit犬尿(KYN)ELISA Kit

枯草芽孢桿菌絲裂原活化蛋白激8相互作用蛋白1抗體Human NR2B ELISA Kit糖還原(AR)ELISA Kit

牛瘟病肌球蛋白輕鏈6抗體Human NOVA2 ELISA Kit縮(ALD)ELISA Kit

副結(jié)核補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)（-）陰性血清磷化肌增強(qiáng)因子2C抗體Human F2R(Proteinase-activated receptor 1) ELISA Kit固(ALD)ELISA Kit

土壤短芽胞桿菌磷化黑色瘤粘附分子CD146抗體Human NOX3(NADPH oxidase 3) ELISA Kit全段甲狀旁腺(i-PTH)ELISA Kit

琥珀乳牛肝菌肌增強(qiáng)因子2C抗體Human NOXA2/p67phox ELISA Kit去乙?；疭irtuin-7(SIRT7/SIR2L7)ELISA Kit

大腸埃希菌促黑激γ1抗體Human NMUR1 ELISA Kit去乙酰化Sirtuin-6(SIRT6/SIR2L6)ELISA Kit

干酪乳桿菌小鼠抗激-M2抗體Human NNT ELISA Kit去乙?；疭irtuin-5(SIRT5/SIR2L5)ELISA Kit

貝萊斯芽胞桿菌甲基化多聚腺苷結(jié)合蛋白抗體Human NPAS1 ELISA Kit去乙?；疭irtuin-4(SIRT4/SIR2L4)ELISA Kit

灰離褶傘有絲分裂原誘導(dǎo)基因6抗體Human NNT ELISA Kit去乙酰化Sirtuin-2(SIRT2/SIR2L/SIR2L2)ELISA Kit

平菇線粒體融合蛋白Mfn2抗體Human NMUR1 ELISA Kit去乙?；疭irtuin-1(SIRT1/SIR2L1)ELISA Kit

地衣芽孢桿菌珠蛋白1抗體Human NOXA2/p67phox ELISA Kit去乙?；囸I激(dGHRL)ELISA Kit

迂回殼囊孢肌球蛋白輕鏈9抗體Human NPAS1 ELISA Kit去唾液糖蛋白受體(ASGPR)ELISA Kit

香菇磷化肌球蛋白輕鏈9抗體Human NO66/C14orf169 ELISA Kit去唾液糖蛋白受體(AGSPR)ELISA Kit

雙孢蘑菇(白蘑菇,、洋蘑菇)NADH復(fù)合體1抗體Human NPAS3 ELISA Kit去甲腎上腺(NE)ELISA Kit

雙環(huán)林地蘑菇癌相關(guān)抗原抗體Human NOB1 ELISA Kit去甲腎上腺(NA)ELISA Kit

微桿菌Microbacterium│sp. 質(zhì)量規(guī)格：pH指示劑羥基積雪草

紅曲霉Monascus│sp. 質(zhì)量規(guī)格：pH指示劑積雪草

紅球菌Rhodococcus│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(T)羥基積雪草苷
LRRK2抑制劑(PF-06447475)polyprotein (DHAV)  鴨型肝炎A病抗體異戊酯 99%

Desmin  結(jié)蛋白抗體異戊酯 ≥99%, FCC, Kosher, FG

DIO2  脫2抗體異戊酯 ≥99.7% (GC)

DISC1 (CT)  DISC1 C端抗體油酯 75.0% (GC)

DISC1(NT)  DISC1 N端抗體油酯 98%

DLK1  穿膜蛋白DLK1抗體酯 ≥99.5% (GC)

DLX4  DLX4抗體酯 ≥98%, FCC, FG

DKK1  抑癌蛋白DKK1抗體酯 99% 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小,，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）,。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物,。

3,、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間,。

4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5,、每孔加50μL 1× MTT 溶液,，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜,。

6、吸出上清液,，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,，用平板搖床搖勻。

7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無570nm 濾光片,，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8,、結(jié)果分析

a,、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,，無細(xì)胞）,，各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,，T 為加藥細(xì)胞的OD 值,，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b,、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)