產(chǎn)品屬性:
中文名稱:腎素抑制劑(Aliskiren)
英文名稱:Aliskiren
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
Aliskiren(CGP60536)是腎素抑制劑,,IC50為1.5nM,。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號(hào):173334-57-1 別名:CGP 60536;CGP60536B;SPP 100 純度:99.57% 分子量:551.76 儲(chǔ)存條件:-20℃,,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用,。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核,、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究,;
③細(xì)胞骨架體系的研究,;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控,;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡),;
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一,、分離與培養(yǎng):
1,、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化,;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二,、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h,;
6,、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
咪唑(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Minocycline hydrochlorideCUE結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體包裝1g
尼考(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Mitoxantrone HCl線粒體復(fù)合物NDUFS1蛋白抗體包裝5g
比洛芬(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Mitoxantrone HCl血栓合成抗體包裝1g
達(dá)拉賓(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Mitoxantrone HCl多癌基因下調(diào)蛋白抗體包裝250mg
伐他汀鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Mizoribine色C氧化蛋白5B抗體包裝1ml
芬那,滅(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Moguisteine色C氧化亞基3抗體包裝1g
喹(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Moguisteine色C氧化亞基6B抗體包裝250mg
康唑(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Mometasone furoate磷化致癌基因C-Myc抗體包裝100g
喹(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Mometasone furoate磷化致癌基因C-Myc抗體包裝25g
西林鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Natamycin,Pimaricin色P450 11B1抗體包裝5g
羅沙星(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Natamycin,Pimaricin環(huán)磷鳥苷抗體包裝100g
馬西尼/馬澤尼(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Nifedipine內(nèi)皮因子維生B12受體抗體包裝25g
尼(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Nifedipine原癌基因cMAF抗體包裝5g
尼辛葡(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Nimodipine18號(hào)染色體開放閱讀框56抗體包裝1g
尿嘧啶,5-脲嘧啶,5-尿嘧啶(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Nimodipine3號(hào)染色體開放閱讀框22抗體包裝25g
毛殼菌屬Chaetomium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%信號(hào)傳導(dǎo)子及轉(zhuǎn)錄激活子4試劑盒烏藥環(huán)戊烯二;Linderone
黑曲霉Aspergillus│niger 質(zhì)量規(guī)格:≥98%,培養(yǎng)級(jí)信號(hào)傳導(dǎo)子及轉(zhuǎn)錄激活子3試劑盒無梗五加苷B;Eleutheroside
短小芽孢桿菌Bacillus│pumilus 質(zhì)量規(guī)格:≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品信號(hào)傳導(dǎo)子及轉(zhuǎn)錄激活子2試劑盒偽金絲桃;Pseudohyperici
腎素抑制劑(Aliskiren)腺苷環(huán)化激活肽-27/38抗體10-去乙酰巴卡丁III 2,6-Dimethyl-3,5-heptanedione
p19ARF抑癌因抗體10-氧多烯紫杉 9H,9H-Triacontafluoro-8,10-heptadecanedione
p21蛋白抗體13-O-(三乙硅)巴卡丁III 9-Bromophenanthrene
P2Y1受體抗體/嘌呤受體抗體13-{[(3-N-Boc)-2,2-二-4S-... 3-Bromophenanthrene
神經(jīng)再生相關(guān)蛋白抗體13-{[(3-N-Boc)-2,2-二-4S-... 3,6-Dimethylphenanthrene
絲裂原活化蛋白激p38α抗體13-{[(3-t-Boc)-2,2-二-4S-... 3-Methylphenanthrene
促尿鈉排泄肽前體C抗體13-{[(3-t-Boc)-2,2-二-4S-... 3-Bromo-1,10-phenanthroline
磷脂磷2C抗體13-{[(3-t-Boc)-2,2-二-4S-... 5-Chloro-1,10-phenanthroline
配對(duì)盒因1抗體13-順式-酯視黃 2-Chloro-1,10-phenanthroline
操作規(guī)程
1,、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定),。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2,、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3,、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,,在37℃孵育4小時(shí),,使MTT 還原為甲臜。
6,、吸出上清液,,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻,。
7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片),。
8,、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,,無細(xì)胞),,各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD,。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值,。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)