詳細介紹
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核,、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究,;
③細胞骨架體系的研究,;
④細胞增殖及其調控,;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡),;
⑦細胞的起源與進化,;
⑧細胞工程.
產品屬性:
英文名稱:MK-0354
產品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
MK-0354是特異性的GPR109a受體激動劑,作用于hGPR109a/mGPR109a,EC50分別為1.65μM和1.08μM,對GPR109b沒有作用效果。 注:本品僅可用于科研實驗,,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號:851776-28-8 純度:98.24% 分子量:176.18 儲存條件:-20℃,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用,。 |
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1,、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化,;
4,、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,,棄去上清,,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5,、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細胞生長至80%融合時,,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2,、PBS沖洗細胞2次,,每次10min,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3、PBS沖洗細胞2次,,每次10min,,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min,;
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜,;
5,、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h,;
6、用PBS沖洗3次,,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1,、在96孔板加入細胞100μL/孔,,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,,需根據細胞的大小,,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2,、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物,。
3、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間,。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。
5,、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,,使MTT 還原為甲臜,。
6、吸出上清液,,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻。
7,、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8,、結果分析
a,、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,,無細胞),,各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,,T 為加藥細胞的OD 值,,C 為對照細胞的OD 值,。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
解整合金屬蛋白9(ADAM9)ELISA Kit英文名稱:ADAM9 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白62抗體包裝250mg
解整合金屬蛋白8(ADAM8)ELISA Kit英文名稱:ADAM8 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白64抗體包裝25g
結合珠蛋白(Hpt)ELISA Kit英文名稱:Hpt ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白72抗體包裝5g
接觸蛋白1(CNTN1)ELISA Kit英文名稱:CNTN1 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白73抗體包裝100g
窖蛋白(CAV1)ELISA Kit英文名稱:CAV1 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白74B抗體包裝25g
角質轉谷酰胺(TGM1)ELISA Kit英文名稱:TGM1 ELISA Kit19號染色體開放閱讀框25抗體包裝5g
角蛋白9(KRT9)ELISA Kit英文名稱:KRT9 ELISA Kit19號染色體開放閱讀框42抗體包裝100g
角蛋白18(KRT18)ELISA Kit英文名稱:KRT18 ELISA Kit19號染色體開放閱讀框44抗體包裝25g
膠質細胞系來源神經營養(yǎng)因子(GDNF)ELISA Kit英文名稱:GDNF ELISA Kit19號染色體開放閱讀框48抗體包裝500g
腱蛋白樣蛋白2(CHRDL2)ELISA Kit英文名稱:CHRDL2 ELISA Kit19號染色體開放閱讀框50抗體包裝100g
堿性鞘磷脂磷二酯(Alk-Smase)ELISA Kit英文名稱:Alk-Smase ELISA Kit19號染色體開放閱讀框51抗體包裝25g
堿性成纖維細胞生長因子(FGF2)ELISA Kit英文名稱:FGF2 ELISA Kit19號染色體開放閱讀框52抗體包裝5g
剪接因子3B亞基3(SF3B3)ELISA Kit英文名稱:SF3B3 ELISA Kit19號染色體開放閱讀框55抗體包裝1g
間隙連接蛋白43(CX43)ELISA Kit英文名稱:CX43 ELISA Kit19號染色體開放閱讀框56抗體包裝5g
間皮(MSLN)ELISA Kit英文名稱:MSLN ELISA Kit19號染色體開放閱讀框57抗體包裝25g
: T63資源名稱: 傷寒沙門氏菌 質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品脂肪結合蛋白4試劑盒羊蹄;Nepodin
米曲霉Aspergillus│oryzae 質量規(guī)格:> 99%,EP脂肪甘油三酯脂試劑盒異肥皂草苷;Isosaponarin
新城疫病毒Rubulavirus│Newcastle disease virus 質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品脂肪分化相關蛋白試劑盒異七葉皂苷Ib;Isoescin Ib
GPR109a受體激動劑(MK-0354)同源盒蛋白轉錄因子EN1抗體17-Hydroxy sprengerinin C Sodium iodide
轉錄因子ER81蛋白抗體2''-O-p-反式香豆酰葒草苷 Starch soluble
谷受體KA1抗體2''-O-p-香豆酰牡荊 Lithium acetate dihydrate
真核翻譯起始因子3K抗體2''-O-鼠李糖羊藿次苷II Ficol 400
早期生長反應蛋白3抗體2'-O-苦參 3,5-Dinitrosalicylic acid
EMSY蛋白抗體2,3,5,4-四羥二乙烯葡萄糖苷,二乙烯苷 Sodium malonate
FBXO36 F-box蛋白相關蛋白36抗體2,3,5,4-四羥二乙烯葡萄糖苷,二乙烯苷(標... Sodium phosphate, monobasic, dihydrate
CAST1蛋白抗體2,3-脫氫維 Malonate
RAB6蛋白抗體2,5,9-三羥-4-氧-9,10-二氫菲 Manganese (II) chloride, tetrahydrate