商品介紹:
Evatanepag(CP-533536)是一種EP2受體選擇性的前列腺素E2(PGE2)激動(dòng)劑,誘導(dǎo)局部骨形成,EC50為0.3nM,。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):223488-57-1 別名:CP-533536 free acid 純度:98.02% 分子量:468.57 儲(chǔ)存條件:-20℃,,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用,。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水),。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞,。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),,加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次,。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml,。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,,室溫避光孵育15min,。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)),。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置,。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),,PI為縱坐標(biāo),。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察,。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI,。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,,細(xì)胞核顯示紅色,,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),,90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%,。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%;二氧化碳,,5%,。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3)凍存液:90%血清,,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,,液氮儲(chǔ)存,。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,,常溫條件下離心5分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
跨膜絲蛋白2(TMPRSS2)ELISA Kit英文名稱(chēng):TMPRSS2 ELISA Kit活化半胱蛋白蛋白3抗體包裝25g
跨膜蛋白27(TMEM27)ELISA Kit英文名稱(chēng):TMEM27 ELISA Kit7號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框61抗體包裝5g
克拉拉細(xì)胞蛋白16(CC16)ELISA Kit英文名稱(chēng):CC16 ELISA Kit少突膠質(zhì)跨膜蛋白抗體包裝1g
可溶性半乳糖凝集3結(jié)合蛋白(LGALS3BP)ELISA Kit英文名稱(chēng):LGALS3BP ELISA Kit激分子B7-1蛋白抗體包裝1g
顆粒體蛋白(GRN)ELISA Kit英文名稱(chēng):GRN ELISA Kit末端補(bǔ)體復(fù)合物抗體包裝250mg
顆粒M(GZMM)ELISA Kit英文名稱(chēng):GZMM ELISA Kit8號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框55抗體包裝25g
顆粒K(GZMK)ELISA Kit英文名稱(chēng):GZMK ELISA Kit補(bǔ)體C4a+C4b蛋白抗體包裝5g
顆粒B(GZMB)ELISA Kit英文名稱(chēng):GZMB ELISA KitCD44V7抗體包裝100g
顆粒A(GZMA)ELISA Kit英文名稱(chēng):GZMA ELISA KitCD44V10抗體包裝25g
抗增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)ELISA Kit英文名稱(chēng):PCNA ELISA KitCD44V4抗體包裝1g
抗凝血(AT)ELISA Kit英文名稱(chēng):AT ELISA Kit緊密連接蛋白4抗體包裝25g
抗繆勒管激(AMH)ELISA Kit英文名稱(chēng):AMH ELISA Kit6號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框140抗體包裝5g
抗利尿激(ADH)ELISA Kit英文名稱(chēng):ADH ELISA KitL型鈣通道蛋白抗體包裝100g
抗酒石性磷(ACP5)ELISA Kit英文名稱(chēng):ACP5 ELISA Kit電壓依賴性鈣通道Cav3.1抗體包裝25g
抗肌蛋白(UTRN)ELISA Kit英文名稱(chēng):UTRN ELISA Kit緊密連接蛋白3抗體包裝5g
: AS1.3221資源名稱(chēng): 約氏乳桿菌 質(zhì)量規(guī)格:含量> 99%,BR,,可用于培養(yǎng)酯酰甘油激ζ試劑盒梓;Catalpol
多粘類(lèi)芽胞桿菌Paenibacillus│polymyxa 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,可用于培養(yǎng)脂氧A4試劑盒知母皂苷 BⅡ;Timosaponin
藍(lán)色犁頭霉Absidia│coerulea 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品脂聯(lián)受體2試劑盒梔子苷;Geniposide
PGE2激動(dòng)劑(Evatanepag)呫噸氫Human, Mouse, Rat
脫氧瓜萎鐮菌Human, Mouse, Rat
無(wú)水赤蘚Human, Mouse, Rat
無(wú)水乙Human, Mouse, Rat
戊乙烯Human
戊寅Human, Mouse
香草Human
辛Human, Mouse, Rat
溴化頻哪Human, Mouse