產(chǎn)品屬性:
中文名稱:p70S6K抑制劑(LY-2584702 tosylate salt)
英文名稱:LY-2584702 tosylate salt
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
LY-2584702甲苯磺酸鹽是p70S6K信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制劑,,能抑制和阻止核糖體S6亞基的磷酸化,。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號(hào):1082949-68-5 純度:98.82% 分子量:617.62 儲(chǔ)存條件:-20℃,,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用,。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核,、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究,;
③細(xì)胞骨架體系的研究,;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控,;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡),;
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1,、無(wú)菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化,;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5,、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜,;
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h;
6,、用PBS沖洗3次,,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
雕刻擬盤多毛孢大鼠Ⅷ相關(guān)抗原Anti-POLA1 Antibody人血管舒緩激肽(BK)
奇異球菌屬大鼠IXAnti-Pogz Antibody人血管舒緩激肽(BK)
海水甲基桿菌小鼠碳酐Anti-POLB Antibody人肌球蛋白輕鏈(MLC)
高盧蜜環(huán)菌人P53Anti-POLB Antibody人肌球蛋白輕鏈(MLC)
千葉鏈霉菌人周期D3Anti-POLD1 Antibody人α-輔肌動(dòng)蛋白3(ACTN-3)
釀酒酵母大鼠ⅩAnti-POLD3 Antibody人α-輔肌動(dòng)蛋白3(ACTN-3)
郝氏鏈霉菌小鼠降鈣基因相關(guān)肽Anti-POLD3 Antibody人超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)
香菇8人周期D2Anti-POLDIP3 Antibody人超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)
松杉靈芝小鼠胃動(dòng)Anti-POLE Antibody人肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)
苜蓿中華根瘤菌大鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉輔因子Anti-POLE Antibody人肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)
芹側(cè)耳大鼠纖溶抗纖溶復(fù)合物Anti-POLG2 Antibody人血清淀粉樣蛋白A(SAA)
假堅(jiān)強(qiáng)芽孢桿菌小鼠生長(zhǎng)抑Anti-POLE4 Antibody人血清淀粉樣蛋白A(SAA)
鏈霉菌人周期D1Anti-POLK Antibody人熱休克蛋白60(Hsp-60)
釀酒酵母人內(nèi)皮抑Anti-POLI Antibody人熱休克蛋白60(Hsp-60)
紅蠟盤菌小鼠血纖蛋白原Anti-POLR1B Antibody人熱休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)
芽孢桿菌大鼠凝血抗凝血復(fù)合物Anti-POLQ Antibody人熱休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)
轉(zhuǎn)化性卷曲含蛋白質(zhì)2地錘菌屬人青光眼小梁網(wǎng)細(xì)胞
微管相關(guān)同源蛋白TPX2抗體茄腐皮鐮刀菌大鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞
腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白5褐赤刺革菌人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞
腫瘤壞死因子誘導(dǎo)蛋白2TNFα-IP2抗體肉座菌屬人皮膚鱗癌細(xì)胞
p70S6K抑制劑(LY-2584702 tosylate salt)松生擬層孔 鬧羊花V
大腸埃希 鬧羊花III
蠟?zāi)?/span> 鬧羊花II
銹蘑 通光藤甙元乙
不吸水鏈霉 D-核糖
圍小叢殼 竹紅
病研所芽孢桿 原偽金絲桃
木耳 愈創(chuàng)甘油
膠紅酵母 異鼠李 3-O-半乳糖苷
蕈狀芽胞桿 異去氫羊藿
植物乳桿 去氧膽酸
腸桿屬 L-谷氨酰
大腸埃希 (S)-(-)-α-氨基-鹽酸鹽
匍枝根霉(黑根霉) S-腺苷蛋對(duì)甲苯磺酸硫酸鹽
褪黑
操作規(guī)程
1,、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定),。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2,、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3,、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,,在37℃孵育4小時(shí),,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻。
7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8,、結(jié)果分析
a,、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,,無(wú)細(xì)胞),,各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b,、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)