詳細介紹
操作流程:
1. 整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū),、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,,各區(qū)實驗服、儀器 ,、耗材應(yīng)獨立使用,,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭,;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置,。
2. 為避免RNA降解,,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測,;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理,。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照,。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,,并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),,并單獨存放,。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標(biāo)記,。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置;不同批號試劑不能混用,。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None,。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄,。
客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計并合成引物,,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,,提供實驗報告給您。
產(chǎn)品名稱:瘧原蟲核酸檢測試劑盒 (熒光PCR法)
規(guī)格:50T
貨號:GOY-M6330
分類:核酸檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,,避免反復(fù)凍融,。
運輸:低溫、避光,,快遞免費送貨上門,。
儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,,操作過程中避免任何細胞刺激,,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離,。
2. 血漿:EDTA,、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清,。
3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物,。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清,。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,,避免反復(fù)凍融,,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合,;
②堿基配對原則,;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性,。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵,。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行,,結(jié)合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度,。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),,其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平,。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞,;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位),;在細菌學(xué)中小檢出率為3個細菌,。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,,一次性地將反應(yīng)液加好后,,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴增反應(yīng),。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,,不一定要用同位素,無放射性污染,、易推廣,。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板,??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液,、洗嗽液,、毛發(fā)、細胞,、活PCR技術(shù)概論,。
Integrin β2/CD18/LFA-1 整合素β2抗體 規(guī)格: 0.1ml*
Microcephalin 1/BRIT1 小腦癥基因1/認(rèn)知相關(guān)蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml*
PBR/DBI/TSPO 外周苯二氮受體抗體 規(guī)格: 0.1ml*
SIP1 Smad蛋白相互作用蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml*
ROR Gamma/RORC/NR1F3 孤兒核受體抗體 規(guī)格: 0.2ml*
FKSG14/Cenomere protein K 著絲粒蛋白K 規(guī)格: 0.2ml*
Phospho-MDM2 (Ser166) 磷酸化雙微體2基因抗體 規(guī)格: 0.1ml*
Dog IgM/Gold 膠體金標(biāo)記的兔抗犬IgM抗體 規(guī)格: 0.5ml*
AQP7 水通道蛋白-7抗體 規(guī)格: 0.1ml*
Annexin VI 膜粘連蛋白6抗體 規(guī)格: 0.1ml*
FGF3/Oncogene INT2 纖維母細胞生因子3抗體 規(guī)格: 0.1ml*
GAS7/Growth Arrest Specific Protein 7 生休止特定蛋白7抗體 規(guī)格: 0.2ml*
Rabbit Anti-chicken IgG/Cy7 Cy7標(biāo)記的兔抗雞IgG 規(guī)格: 0.1ml*
CAPD3/hCAP-D3 濃素2復(fù)合亞基D3抗體 規(guī)格: 0.2ml*
Leptin receptor/Ob-R 瘦素受體抗體 規(guī)格: 0.1ml*
瘧原蟲核酸檢測試劑盒 (熒光PCR法)Blue Sepharose CL-6B 藍色-瓊脂糖凝膠 CL-6B25mL瓶
Methyl Cellulose 甲纖維素25g瓶
Methyl Red 甲紅25g瓶
Cytochalasin B 細胞松弛素B1mg瓶
Piperacillin 哌拉西林5g瓶
Diosimin 地奧司明520-27-420mg
1-Deoxynojirimycin 脫氧野尻霉素19130-96-25mg
Cloimazole 克霉唑23593-75-1100mg
Carbamazepine 卡馬西平298-46-4100mg
Chlorteacycline HCl 鹽酸金霉素64-72-2100mg
透析袋夾子60mm個
100mm濾膜 (50張/盒)0.45um盒
EDAC 1-乙基-(3-二甲氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽25g瓶
4-Hydroxyquinoline 4-羥基喹啉5g瓶
Sepharose CL-6B 交聯(lián)瓊脂糖凝膠CL-6B100ml瓶