以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
商品介紹:
Nylidrin hydrochloride是被動致敏大鼠腹腔肥大細胞中IgE介導的組胺釋放抑制劑,具有抗過敏的功效,。 注:本品僅可用于科研實驗,,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號:849-55-8 別名:Buphenine hydrochloride 純度:98.91% 分子量:335.87 儲存條件:-20℃,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用,。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),,90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%,。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%;二氧化碳,,5%,。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3)凍存液:90%血清,,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,,液氮儲存,。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng),。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,,1000RPM,,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水),。
2) 對于懸浮細胞,,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,,胰酶消化時間不宜過長或過短,,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,,將細胞輕輕吹打下來,,轉移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細胞,。
3) 收集細胞后,,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,,共洗滌兩次,。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,,使細胞濃度達到1×106 cell/ml,。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,,輕輕混勻,,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設置經(jīng)凋亡誘導的正常細胞,、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,,正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),,F(xiàn)ITC為橫坐標,PI為縱坐標,。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光,。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察,。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI,。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,,細胞核顯示紅色,,膜上有綠色光環(huán)。
假單胞菌胰羧肽B1抗體Human CEP63 ELISA Kit山羊促卵泡(FSH)免疫試劑盒
蕈狀芽孢桿菌維甲結合蛋白2抗體Human CARS (Cysteine–tRNA ligase, cytoplasmic) ELISA Kit山羊促甲狀腺(TSH)免疫試劑盒
亞鉤針孔菌2號染色體開放閱讀框80抗體Human CSNK1D(Casein Kinase 1 delta) ELISA Kit山羊雌激(E)免疫試劑盒
卡伍爾鏈霉菌磷化CD32B抗體Human CCT3 ELISA Kit山羊雌二(E2)免疫試劑盒
帕氏食氫產(chǎn)水菌過敏C3(補體C3)抗體Human CD1A ELISA Kit山羊超氧化物歧化2,,線粒體(SOD2)免疫試劑盒
雀斑蘑菇癌胚抗原相關粘附分子抗體Human CASP6(Caspase 6) ELISA Kit山羊超氧化物歧化1,可溶性(SOD1)免疫試劑盒
黑曲霉質(zhì)多聚腺苷結合蛋白1抗體Human CD209 ELISA Kit山羊超氧化物歧化(SOD)免疫試劑盒
浸麻類芽孢桿菌半胱蛋白抑制劑7抗體Human Cathepsin H ELISA Kit山羊補體蛋白4(C4)免疫試劑盒
伯頓畢赤酵母22號染色體開放閱讀框29抗體Human CCDC158 (Coiled-coil domain-containing protein 158) ELISA Kit山羊補體蛋白3(C3)免疫試劑盒
解烷烴游動微菌神經(jīng)表面蛋白F3Human CBP20 (NCBP 20 kDa subunit) ELISA Kit山羊二(MDA)免疫試劑盒
盤長孢狀盤孢組織蛋白C抗體Human CCDC83 ELISA Kit山羊胞外超氧化物歧化[Cu-Zn](SOD3)免疫試劑盒
Microvirga aerophila 半胱蛋白蛋白-4抗體Human CCDC25 (Coiled-coil domain-containing protein 25) ELISA Kit山羊白介8(IL-8/CXCL8)免疫試劑盒
玫瑰綠色鏈霉菌活化半胱蛋白蛋白3抗體Human CCKBR(Gastrin/cholecystokinin type B receptor) ELISA Kit山羊白介6(IL-6)免疫試劑盒
魔鬼弧菌7號染色體開放閱讀框61抗體Human CCNI2 ELISA Kit山羊白介4(IL-4)免疫試劑盒
溥硬皮馬勃少突膠質(zhì)跨膜蛋白抗體Human CAMK2D(CaMKII delta) ELISA Kit山羊白介2受體(IL-2R)免疫試劑盒
鉤狀木霉激分子B7-1蛋白抗體Human CaMKIV (Calcium/calmodulin-dependent protein kinase type IV) ELISA Kit山羊白介2(IL-2)免疫試劑盒
地中海馬特爾氏菌Martelella│mediterranea 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRPC4,SFRS1互動蛋白1試劑盒鄰氧基肉桂
側柄褐孔菌Fuscoporia│discipes 質(zhì)量規(guī)格:BRP53抗體ELISA Kit雷帕霉
新城疫病毒Rubulavirus│Newcastle disease virus 質(zhì)量規(guī)格:鉍含量:>56%,BRP2蛋白抗體試劑盒克班寧
組胺釋放抑制劑(Nylidrin hydrochloride)葡聚糖D20/右旋糖苷英文名稱: Phospholipase A2 ActivatingPeptide蛋白酪磷-1B抗體包裝1g
普拉克索堿英文名稱: PhysalaeminCyclin A1相互作用蛋白抗體包裝5g
普拉洛芬英文名稱: PKI-tide野生型P53誘導基因1單克抗體包裝1g
普侖司特英文名稱: Plaet Factor 4 (58-70)(human)多囊腎蛋白1抗體包裝1g
普瑞巴林英文名稱: Pneumadin (human)多囊腎蛋白2抗體包裝250mg
齊多夫定英文名稱: Pneumadin (rat)凋亡相關蛋白4抗體包裝2ml
齊留通英文名稱: Prion Peptide (106-126),Human磷脂酰肌激催化亞單位D抗體包裝25g
羥磺鈣英文名稱: Proadrenomedullin (1-20)(human)血小板源性生長因子受體β樣蛋白抗體包裝5g
氫化奎寧定;雙氫奎尼丁英文名稱: Proadrenomedullin (45-92)(human)磷化磷酯Cβ3抗體包裝25ml
氫檳榔堿(進口)英文名稱: Protein Kinase C (19-31)磷化蛋白激樣內(nèi)質(zhì)網(wǎng)激抗體包裝5ml
氫檳榔堿; 檳榔堿氫鹽(國產(chǎn))英文名稱: Protein Kinase C (19-36);Protein Kinase C Selective Inhibitor Protein6磷果糖激2抗體包裝100g
氫達非那新英文名稱: Protein Kinase C (530-558)磷化6磷果糖激2抗體包裝1g
氫后馬托品英文名稱: pTH-Related Protein Splice Isoform 3 (140-173) (human)磷化磷脂酰肌激抗體包裝25g
氫加蘭他敏英文名稱: pTH (13-34) (human)磷化蛋白激C α/β2抗體包裝5g
氫右美沙芬英文名稱: pTH (3-34) (bovine)蛋白激C α抗體包裝100g