p38MAPK抑制劑(SB 203580)公司*的產(chǎn)品：Anti-Phospho-MK1/2 (Ser221)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化原活化蛋白激酶激酶1/2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-TM/Biotin 化血栓調(diào)節(jié)蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh A

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：p38MAPK抑制劑(SB 203580)

英文名稱：SB 203580

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg|200mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核,、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究,；

③細(xì)胞骨架體系的研究,；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控,；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡),；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化,；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一,、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小,；

2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s,，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s,，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化；

4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,，1200r/min 離心10min，棄去上清,，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；

5、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基,，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二,、免疫熒光鑒定：

1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,；

2,、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min,；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min,；

4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜,；

5,、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h；

6,、用PBS沖洗3次,，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。

氧化白藜蘆-3'-O-β-D-吡喃葡萄糖苷英文名稱： ANTHRALIN一氧化氮合成-2抗體（誘導(dǎo)型）包裝5g

氧化槐定堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： 4-Hydroxyphenylacetamide腦紅蛋白/神經(jīng)血紅蛋白/神經(jīng)球蛋白抗體包裝100g

氧化槐果堿（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Prochlorperazine神經(jīng)激肽A抗體包裝25g

氧化苦參堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Prochlorperazine磷化膜相關(guān)蛋白Numb抗體包裝5g

氧化前胡(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： TGX-221磷化核有絲分裂器NuMA蛋白抗體包裝1g

氧化芍藥苷,羥基芍藥苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： 2-Acetyl-6-methoxynaphthalene核有絲分裂器NuMA蛋白抗體包裝25g

藥根堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Phenprobamate膜相關(guān)蛋白Numb抗體包裝5g

野百合堿（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Halcinonide谷受體2A抗體包裝1g

野黃芩苷(標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Choline chloride磷化谷受體2B抗體包裝25g

野黃芩(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Ganoderic acid G 谷受體2B抗體包裝5g

野菊花（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Pipemidic acid磷化核仁磷蛋白抗體包裝1g

野馬追（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： FLUPHENAZINE HYDROCHLORIDE磷化核仁磷蛋白抗體包裝5g

野馬追內(nèi)酯A（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： (+)-Brusatol磷化核仁磷蛋白抗體包裝100g

野馬追內(nèi)酯B（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Prazosin HCl核因子κB抑制蛋白β抗體包裝25g

野馬追內(nèi)酯K英文名稱： 7-Hydroxycoumarin磷化谷受體2A抗體包裝5g

擬皺褶假絲酵母Candida│pseudorugosa 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,分析標(biāo)準(zhǔn)品角化生長(zhǎng)因子試劑盒蟲(chóng)草;Cordycepin

: ivcas7.01205資源名稱: 蠟狀芽孢桿菌 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR角化內(nèi)分泌因子試劑盒常春藤皂苷元;Hederagenin

: IFFI3078資源名稱: 少根根霉 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,分析標(biāo)準(zhǔn)品膠轉(zhuǎn)蛋白試劑盒蟾靈;Bufalin
p38MAPK抑制劑(SB 203580)腫瘤壞死因子配體超家族成員18抗體乙香芹酯/2--5-(2-烯)-2-環(huán)己烯-1-乙酯 CARVYLACETATE, (-)-(RG)Human

腫瘤壞死因子受體超家族成員14抗體(-)-香芹 CARVONE, (-)-(AS)Human, Mouse, Rat

磷化血管生成受體2抗體(+)-香芹 CARVONE, (+)-(SG)Human, Mouse, Rat

轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β活化激1葛縷 CARVEOL (RG)Human

磷化轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β活化激1葛縷 CARVEOL (RG)Human, Mouse

磷化轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β活化激1香芹乙酯 CARVACRYL ACETATE(RG)Human, Mouse

磷化轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β活化激1香芹乙酯 CARVACRYL ACETATE(RG)Human, Mouse, Rat

磷化血管生成受體2抗體香芹酚 CARVACROL(ISOTHYMOL)(P)Human, Mouse

磷化色羥化抗體香芹酚 CARVACROL(ISOTHYMOL)(P)Human 

操作規(guī)程

1,、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）,。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2,、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3,、將96孔板在37℃,，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,，在37℃孵育4小時(shí),，使MTT 還原為甲臜。

6,、吸出上清液,，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻,。

7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片,，可以使用560-600nm 的濾光片）,。

8,、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT,，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD,。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值,。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b,、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)