公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核,、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究,;
③細(xì)胞骨架體系的研究,;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控,;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡),;
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:PI3K α/δ抑制劑(ETP-46321)
英文名稱:ETP-46321
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
ETP-46321是一高效,、的PI3K α/δ抑制劑,,對(duì)p110α和p110β的IC50值分別為2.3nM和14.2nM,還對(duì)突變型p110α(E542K;E545K,;H1047R)有顯著抑制,,IC50為1.77-2.33nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號(hào):1252594-99-2 純度:98.0% 分子量:473.55 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用,。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化,;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5,、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二,、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h,;
6,、用PBS沖洗3次,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,,需根據(jù)細(xì)胞的大小,,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2,、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物,。
3、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間,。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。
5,、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),,使MTT 還原為甲臜,。
6,、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻,。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片),。
8、結(jié)果分析
a,、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),,各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD,。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值,。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
胰島原(PI)ELISA Kit英文名稱:PI ELISA Kit磷化系統(tǒng)性紅斑狼瘡先關(guān)蛋白TREX1抗體包裝1g
胰島樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白6(IGFBP-6)ELISA Kit英文名稱:IGFBP-6 ELISA Kit磷化系統(tǒng)性紅斑狼瘡相關(guān)蛋白TREX1抗體包裝1g
胰島樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白4(IGFBP-4)ELISA Kit英文名稱:IGFBP-4 ELISA Kit接頭相關(guān)蛋白復(fù)合體AP-2μ鏈1抗體包裝25g
胰島樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白2(IGFBP-2)ELISA Kit英文名稱:IGFBP-2 ELISA Kit磷化接頭相關(guān)蛋白復(fù)合體AP-2μ鏈1抗體包裝5g
胰島樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1(IGFBP-1)ELISA Kit英文名稱:IGFBP-1 ELISA Kit膜粘連蛋白7抗體包裝100g
胰島樣生長(zhǎng)因子2(IGF-2)ELISA Kit英文名稱:IGF-2 ELISA Kit3號(hào)染色體開放閱讀框15抗體包裝500g
胰島樣生長(zhǎng)因子1受體(IGF-1R)ELISA Kit英文名稱:IGF-1R ELISA Kit載脂蛋白B受體抗體包裝25g
胰島樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)ELISA Kit英文名稱:IGF-1 ELISA Kit三磷腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體包裝5g
胰島受體β(ISR-β)ELISA Kit英文名稱:ISR-β ELISA Kit載脂蛋白B抗體包裝1g
胰島降解(IDE)ELISA Kit英文名稱:IDE ELISA Kit花生四烯15脂氧合2抗體包裝25g
胰島(INS)ELISA Kit英文名稱:INS ELISA Kit載脂蛋白C4抗體包裝5g
原激活肽(TAP)ELISA Kit英文名稱:TAP ELISA Kit低密度脂蛋白受體銜接蛋白抗體包裝1g
1(trypsin-1)ELISA Kit英文名稱:trypsin-1 ELISA Kit原始廣泛存在蛋白1抗體包裝250mg
(trypsin)ELISA Kit英文名稱:trypsin ELISA Kit錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白37抗體包裝5g
胰α淀粉(AMY2A)ELISA Kit英文名稱:AMY2A ELISA Kitα1,4-半乳糖基轉(zhuǎn)移1包裝25g
激活受體2B抗體程序性死亡蛋白1配體1(PDCD1LG1)Rucaparib phosphate (AG-014699 phosphate) 是一種有效,、可口服的 PARP 抑制劑,,結(jié)合 PARP1 的Ki 為 1.4
PI3K α/δ抑制劑(ETP-46321)生物鐘KAT13D蛋白抗體佛手柑;香檸檬;佛手柑亭;香檸檬亭(標(biāo)準(zhǔn)品) Nigericin sodium
Kelch樣蛋白36抗體佛司可林(標(biāo)準(zhǔn)品) Nonactin
離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白KCC4抗體呋拉茶 Trichostatin A from Streptomyces sp
磷化離子通道蛋白Kv1.3抗體弗朗鼠李皮(標(biāo)準(zhǔn)品) Acetovanillone
離子通道蛋白家族成員4抗體扶芳藤(標(biāo)準(zhǔn)品) Acetovanillone
電壓門控性通道蛋白亞kv5.1抗體茯苓(標(biāo)準(zhǔn)品) Polydatin
電壓門控性通道蛋白亞kv6.1抗體茯苓(標(biāo)準(zhǔn)品) Polydatin
電壓門控性通道蛋白亞KV6.3抗體茯苓新A 1-Octadecanol
磷化內(nèi)流通道蛋白KCNJ1抗體浮萍(標(biāo)準(zhǔn)品) 1-Octadecanol