公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究,;
②生物膜與細(xì)胞器的研究,;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控,;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化,;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:自噬激酶ULK1抑制劑(SBI-0206965)
英文名稱:SBI-0206965
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
SBI-0206965是一種強(qiáng)效,選擇性和細(xì)胞滲透性自噬激酶ULK1抑制劑,抑制ULK1和ULK2激酶活性,IC50值分別為108nM和711nM,。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號(hào):1884220-36-3 純度:98.04% 分子量:489.32 儲(chǔ)存條件:-20℃,,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用,。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一,、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二,、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h;
6,、用PBS沖洗3次,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定),。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物,。
3,、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間,。
4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5,、每孔加50μL 1× MTT 溶液,,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜,。
6,、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻,。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片),。
8、結(jié)果分析
a,、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),,各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD,。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值,。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b,、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
間型彎孢線粒體二羧載體蛋白抗體Anti-GLO1 Antibody纖維蛋白(FBL)
葡萄座腔菌類固受體激活蛋白1抗體Anti-GLI3 Antibody纖溶抑制因子(TAFI)
葡萄座腔菌S100A14/15抗體Anti-GLRX2 Antibody纖溶原激活物抑制因子2(PAI2)
大豆慢生根瘤菌組蛋白甲基轉(zhuǎn)移SMYD2抗體Anti-GLRX Antibody纖溶原激活物抑制因子1(PAI1)
加里福尼亞鏈霉菌沉默調(diào)節(jié)樣蛋白SirT7抗體Anti-GLRX2 Antibody纖溶/抗纖溶復(fù)合體(PAP)
大腸埃希氏菌沉默調(diào)節(jié)相關(guān)蛋白6抗體Anti-Glycine decarboxylase/GLDC Antibody纖溶(Fbn)
枯草芽孢桿菌磷化沉默調(diào)節(jié)相關(guān)蛋白6抗體Anti-GLRX3 Antibody仙掌(Cactin)
Pseudomonas torakense指轉(zhuǎn)錄因子Slug抗體Anti-GNAQ Antibody夏科雷登氏結(jié)晶蛋白(CLC)
粘質(zhì)沙雷氏菌磷化腦質(zhì)膜單轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白PMAT抗體Anti-GNB1 Antibody(PB1121)下丘泌受體2(HCRTR2)
枯草芽孢桿菌突觸蛋白6抗體Anti-Glypican 5/GPC5 Antibody下丘泌受體1(HCRTR1)
豌豆根瘤菌腦質(zhì)膜單轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白PMAT抗體Anti-Glutaminase/GLS Antibody周期Y(CCNY)
馬德里青霉超氧化物歧化4抗體Anti-GNG11 Antibody周期T2(CCNT2)
大腸埃希氏菌可溶性載質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2B1抗體Anti-GNG2 Antibody周期T(CCNT)
松口蘑磷化外紡錘體樣蛋白1抗體Anti-GNG4 Antibody周期O(CCNO)
木賊鐮孢小跨膜糖化蛋白抗體Anti-GNS Antibody周期M4(CCNM4)
谷棒桿菌鈉通道蛋白10α抗體Anti-Golm1/GOLPH2 Antibody周期M3(CCNM3)
唾液結(jié)合免疫球蛋白樣凝集9抗體膨端青霉人腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞
心血管調(diào)節(jié)肽Salusin-α抗體粟酒裂殖酵母人臍靜脈平滑肌細(xì)胞
絲/蘇激36融合同源蛋白抗體降短桿菌人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞
S100鈣結(jié)合蛋白A7抗體格氏李斯特氏菌人心肌成纖維細(xì)胞
自噬激酶ULK1抑制劑(SBI-0206965)釀酒酵母 鋰、鈉/Li, Na/2.0µg/ml ;,、氨/K, NH3/200µg/ml粘蛋白5ACElisa
草酸青霉 銅,、錳、鋅/Cu, Mn, Zn/100µg/ml ;鐵/Fe/500µg/ml血小板糖蛋白VElisa
雞傷寒沙門氏 鎘,、鋅/Cd, Zn/10µg/ml ;銅/Cu/50µg/ml ;鉛/Pb/100µg/ml骨形成蛋白2Elisa
解脂亞羅酵母 砷,、鎘、鉛/As, Cd, Pb/10µg/ml ;錳/ Mn/100µg/ml肌鈣蛋白IElisa
立枯絲核 鉻/Cr/0.5µg/ml ;釩,、鋯/V, Zr/1.0µg/ml ;鋁,、鈦/Al, Ti/10µg肌鈣蛋白TElisa
大腸埃希氏 鈣、,、鎂,、鈉/Ca, K, Mg, Na/5µg/ml ;鋁、鐵,、鋅/Al, Fe, Zn/10µ谷氨酰合成Elisa
枯草芽孢桿 銅,、錳、鋅/Cu, Mn, Zn/100µg/ml ;鐵/Fe /500µg/ml ;,、鈣,、鈉、鎂凝血因子XElisa
硫色鐮刀 鋇,、銅,、錳/Ba, Cu, Mn/5µg/ml ;鋰、硒,、鋅/Li, Se, Zn/10µg/ml凝血因子ⅨElisa
蛋白原乳桿 鎘,、鉻、硒/Cd, Cr, Se/1µg/ml ;砷,、銅,、錳、鎳,、錢/As, Cu, Mn, Ni,酸性鞘磷脂Elisa
哈茨木霉 鋁,、砷、鋇,、鎘,、鈷、鉻,、銅,、錳、鉬,、鎳,、鉛,、硒、鍶,、鋅/Al, As, Ba, Cd, Co, Cr玉米赤霉烯酮Elisa
棲藻海卵 砷,、鋇、鎘,、鉻,、銅、鐵,、鎂、錳,、鎳,、鋅/As, Ba, Cd, Cr, Cu, Fe, Mg, Mn觸珠蛋白Elisa
楊盤二孢* 鋁、砷,、,、鋇、鈹,、鎘,、鈷、鉻,、銅,、錳、鉬,、鈉,、鎳、鉛,、銻,、硒、錫,、鈦,、、釩,、鋅,、鋯/Al, As過氧化氫Elisa
蟹味菇(白) 鋁、砷,、,、鋇、鈹,、鎘,、鈷,、鉻、銅,、錳,、鉬、鈉,、鎳,、鉛、銻,、硒,、錫、鈦,、,、釩、鋅,、鋯/Al, AsIII型前膠原Elisa
枯草芽孢桿 鋇,、鍶、/Ba, Sr, Tl /50µg/ml ;鋁,、砷,、、鈹,、鉍,、鈣、鎘,、鈷,、鉻、銅,、鐵,、IV型膠原Elisa
大腸桿 鋇/Ba/1600µg/ml ;鍶/Sr/600µg/ml ;鈣/Ca/400µg/ml ;鎂/Mg羥脯氨酸Elisa