產(chǎn)品屬性:
中文名稱:IMPDH抑制劑(AVN-944)
英文名稱:AVN-944
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
AVN-944(VX-944)是選擇性非競爭性IMPDH抑制劑,對(duì)IMPDH1和IMPDH2的Ki值為6-10nMIMPDH,。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):297730-17-7 別名:VX-944 純度:99.91% 分子量:477.51 儲(chǔ)存條件:-20℃,,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用,。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核,、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究,;
③細(xì)胞骨架體系的研究,;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控,;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡),;
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一,、分離與培養(yǎng):
1,、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化,;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5,、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h,;
6、用PBS沖洗3次,,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
葡枝根霉Escherichia coli大鼠視黃結(jié)合蛋白(RBP)
棒狀雙歧桿菌Escherichia coli大鼠促性腺激釋放激受體抗體(GNRHR-Ab)
枝狀枝孢菌Escherichia coli大鼠促性腺激釋放激受體抗體(GNRHR-Ab)
芽孢桿菌Escherichia coli大鼠血管性血友病因子裂解蛋白(ADAMTS13/vWF-cp)
枯草芽孢桿菌Escherichia coli大鼠血管性血友病因子裂解蛋白(ADAMTS13/vWF-cp)
變異棒桿菌Escherichia coli大鼠主要堿性蛋白(MBP)
木霉屬Escherichia coli大鼠主要堿性蛋白(MBP)
萬壽菊黃色桿菌Escherichia coli大鼠嗜性粒陽離子蛋白(ECP)
局限青霉Escherichia coli大鼠嗜性粒陽離子蛋白(ECP)
盤長孢狀盤孢Escherichia coli大鼠鈣調(diào)磷(CaN)
蘑菇Escherichia coli大鼠鈣調(diào)磷(CaN)
皺褶青霉Escherichia coli大鼠抑制結(jié)合蛋白(INHBP)
褐平臍蠕孢Escherichia coli大鼠抑制結(jié)合蛋白(INHBP)
嗜幾丁質(zhì)芽孢桿菌Escherichia coli大鼠抗甲狀腺過氧化物抗體(TPO-Ab)
魯?shù)劓溍咕?/span>Escherichia coli大鼠抗甲狀腺過氧化物抗體(TPO-Ab)
黃綠木霉Escherichia coli大鼠凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)
蛋白體復(fù)合物C5抗體小孔異擔(dān)子菌花鼠皮膚成纖維樣細(xì)胞
磷脂A2激活蛋白抗體光核纖孔菌花鼠腎上皮樣細(xì)胞
胸苷磷化抗體齒白木層孔菌銀星竹鼠皮膚成纖維樣細(xì)胞
早老蛋白-2抗體擬緣小孔菌姬鼠皮膚細(xì)胞
IMPDH抑制劑(AVN-944)淺灰鏈霉 L-蛋(甲硫)
香魚假單胞 DL-蛋(甲硫)
枯草芽孢桿 醋酸辛酯
冬蟲夏草(冬蟲夏草,,蝙蝠蛾被毛孢,,中華被毛孢) 蟲草
東方伊薩酵母 補(bǔ)骨脂二氫黃酮甲
芽孢桿屬 補(bǔ)骨脂二氫黃酮
墻支頂孢 補(bǔ)骨脂定
毛霉 表兒茶
蘋果輪紋 表白樺脂酸
洋蔥伯克霍爾德 L-苯
光帽鱗傘(滑菇) D-半乳糖
β-
江西盤孢 L-
無殼曲霉 γ-氨基丁酸
葡萄白腐 1,8-桉葉
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定),。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物,。
3、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間,。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。
5,、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),,使MTT 還原為甲臜,。
6、吸出上清液,,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻,。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片),。
8、結(jié)果分析
a,、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),,各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD,。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值,。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)