Tip60抑制劑(MG 149)公司正在出售的產(chǎn)品：Proteasome 20S LMP2 /FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大,、小鼠低分子質(zhì)量蛋白2抗體IgG
Proteasome 20S LMP7 /FITC 熒光標(biāo)記低分子質(zhì)量蛋白7抗體IgG
Melamine/HRP 辣根過氧化物標(biāo)記抗三聚抗體IgG
PS-1/FITC 熒光標(biāo)記早老蛋白-1抗體IgG
PS-1/FITC 熒光標(biāo)記早

商品介紹：

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）,。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞,。

對(duì)于貼壁細(xì)胞,，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短,，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來,，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),，500-1000g離心5min收集細(xì)胞,。

3) 收集細(xì)胞后,，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次,。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml,。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中,，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻,，室溫避光孵育15min,。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）,。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置,。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot）,，F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片,，顯微鏡下觀察,。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán),。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán),。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO),，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%,。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%,；二氧化碳,，5%。 溫度：37℃,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。

3）凍存液：90%血清,，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配,，液氮儲(chǔ)存,。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM,，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

泰國(guó)葡糖桿菌Escherichia coli大鼠肉堿脂酰轉(zhuǎn)移(CACT)

粘紅酵母Escherichia coli大鼠磷化乙酰羧化(pACCase)

靈芝Escherichia coli大鼠磷化乙酰羧化(pACCase)

綠產(chǎn)色鏈霉菌Escherichia coli大鼠金屬硫蛋白(MT)

假單胞菌Escherichia coli大鼠金屬硫蛋白(MT)

根霉菌Escherichia coli大鼠心肌特異性肌鈣蛋白T(c)

溜曲霉Escherichia coli大鼠心肌特異性肌鈣蛋白T(c)

桃色枝頂孢Escherichia coli大鼠乙酰酯(AChE)

大腸埃希菌Escherichia coli大鼠乙酰酯(AChE)

JonesiaEscherichia coli大鼠糖缺失性轉(zhuǎn)鐵蛋白(CDT)

枯草芽胞桿菌Escherichia coli大鼠糖缺失性轉(zhuǎn)鐵蛋白(CDT)

木霉Escherichia coli大鼠總膽汁(TBA)

類諾氏菌Escherichia coli大鼠總膽汁(TBA)

皺褶假絲酵母Escherichia coli大鼠β2微球蛋白(BMG/β2-MG)

黃團(tuán)孢鏈霉菌Escherichia coli大鼠β2微球蛋白(BMG/β2-MG)

薄層菌Escherichia coli大鼠視黃結(jié)合蛋白(RBP)

磷化絲抗體懷槐多年臥孔菌雙位點(diǎn)HC-kit受體細(xì)胞株

小鼠增殖細(xì)胞核抗原單克抗體寬被多年臥孔菌社鼠皮膚成纖維樣細(xì)胞

蛋白磷2Cα抗體喜皮多年臥孔菌社鼠肺成纖維樣細(xì)胞

蛋白激C抗體軟帕氏孔菌花鼠肌肉成纖維樣細(xì)胞
Tip60抑制劑(MG 149)枯草芽孢桿 甘草酸二鹽

米曲霉 L-胱

淡紫擬青霉 L-瓜

紫穗槐根瘤 L-谷氨酰

枯草芽孢桿 L-谷

枯草芽孢桿 甘

坂口莊劍云氏酵母 L-脯

大腸埃希氏 蒽醌

乳桿屬 對(duì)乙酰氨基

鵝膏屬 對(duì)傘花烴

枯草芽孢桿 杜鵑

薄層屬 東莨菪內(nèi)酯

中山小短桿 東莨菪苷

短密青霉 丁香酸

豬丹絲 膽固