PI3K抑制劑(PF-4989216)公司*的產(chǎn)品：Anti-PI3K/P85 alpha/FITC 熒光素標(biāo)記磷脂酰肌醇激酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rabbit Anti-human sIgA 兔抗人分泌型IgA (親和層析純化)Multi-class antibodies規(guī)格： 1mg
磷脂?；嫉鞍拙厶?3抗體 Anti-GPC3 0.

商品介紹：

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：PI3K抑制劑(PF-4989216)

英文名稱：PF-4989216

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究,；

②生物膜與細(xì)胞器的研究,；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控,；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控,；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化,；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一,、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s,，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s,，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化；

4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,，1200r/min 離心10min，棄去上清,，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；

5、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基,，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二,、免疫熒光鑒定：

1,、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,；

2,、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min,；

4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,；

5,、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h；

6,、用PBS沖洗3次,，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小,，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）,。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物,。

3,、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間,。

4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5,、每孔加50μL 1× MTT 溶液,，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜,。

6,、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,，用平板搖床搖勻,。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片,，可以使用560-600nm 的濾光片）,。

8,、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT,，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD,。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值,。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b,、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

小鼠組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA試劑盒 ，英文名： t-PA ELISA Kit

小鼠磷酸肌醇3激酶(PI3K)ELISA檢測試劑盒MousePhosphotylinosital3kinase,PI3KELISAKit 96T/48T

人抗促卵泡素抗體(Ai FSH Ab)免疫試劑盒 Human Ai FSH Ab ELISA Kit

rabbitThyroidStimulatingHormone,TSHELISAKit兔子促甲狀腺素(TSH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細(xì)胞CDK4蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒10/20次

Humanβamyloidprecursorprotein,βAPPELISA試劑盒人淀粉樣前體蛋白(βAPP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠白介素33(IL-33)ELISA試劑盒 ,，英文名： IL-33 ELISA Kit

大鼠血小板因子3(PF-3)ELISA檢測試劑盒Ratplateletfactor3,PF3ELISAKit 96T/48T

人T細(xì)胞活化連接蛋白(LAT)免疫試劑盒 Human LAT ELISA Kit

英文名稱MouseEpinephrineELISAKit小鼠腎上腺素(Epinephrine)規(guī)格：96T/48T

TEM電鏡石蠟切片免疫組織化學(xué)HRP酶聯(lián)DAB間接檢測試劑盒(含HRP二抗)20次

RabbitLysozyme,LZMELISA試劑盒兔溶菌酶(LZM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

豬中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human melanoma associated aigen (MAGE) ELISA Kit 人黑色素瘤相關(guān)抗原(MAGE)ELISA試劑盒

Rabbitpigmeepithelium-derivedfactor,PEDFELISAKit 兔色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA試劑盒 96T/48T 分裝

CLIAKitforapo-A5(HumanapoproteinA5)ELISAKit人載脂蛋白A5規(guī)格：48T/96T

血清/血漿游離脂肪酸酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒10次

Porcineleukemiainhibitoryfactorreceptor,LIFRELISAKit豬白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
PI3K抑制劑(PF-4989216)synaptotagmin-2 英文名稱： 突觸結(jié)合蛋白相關(guān)基因2抗體 0.1ml

phospho-MEK1 + MEK2 (Ser222 + Ser226) 英文名稱： 磷酸化原活化蛋白激酶1抗體 0.1ml

CD3抗體 Anti-CD3 0.1ml

Anti-VDCC-L Beta/FITC 熒光素標(biāo)記L-型電壓依賴型鈣通道β抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-GSK3 alpha(Ser21) 磷酸化葡萄糖合成激酶3α抗體 GSK3α(Phospho-Ser21) 規(guī)格 0.1ml

CD62L (ELAM-1/L-Selectin ) L選擇素抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg