產(chǎn)品屬性:
中文名稱:B-Raf抑制劑(GDC-0879)
英文名稱:GDC-0879
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
GDC-0879是高活性B-Raf選擇性抑制劑,IC50為0.13nM,,與對c-Raf的抑制性接近,,對其它的激酶則無抑制活性。 注:本品僅可用于科研實驗,,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號:905281-76-7 純度:99.70% 分子量:334.37 儲存條件:-20℃,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用,。 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究,;
②生物膜與細胞器的研究,;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調(diào)控,;
⑤細胞分化及其調(diào)控,;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化,;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一,、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復此步驟2-3次,,直至組織*被消化;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,,1200r/min 離心10min,棄去上清,,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5,、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二,、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min,;
2、PBS沖洗細胞2次,,每次10min,,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3,、PBS沖洗細胞2次,每次10min,,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細胞30min;
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5,、PBS沖洗細胞3次,,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h,;
6,、用PBS沖洗3次,,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
泗川類芽孢桿菌人TGF-β誘導早期基因1Anti-Phospho STXBP2 (Ser513) Antibody人抗類風濕關(guān)節(jié)炎核抗原(RANA)
壁芽孢桿菌人腫瘤血管生長因子Anti-Phospho TNNI3 (cardiac) (Ser23/24) Antibody人抗類風濕關(guān)節(jié)炎核抗原(RANA)
蠟蚧菌小鼠熱休克蛋白40Anti-Phospho TERF1 (Ser219) Antibody人TH糖蛋白(THP)
蠟樣芽孢桿菌大鼠血清總補體Anti-Phospho TNS2 (Y483) Antibody人TH糖蛋白(THP)
新月彎孢霉*大鼠可溶性CD86Anti-Phospho TNS2 (Tyr483) Antibody人腎小球組織糖基化終末產(chǎn)物(GTE-AGE)
豬丹絲菌人角蛋白20Anti-Phospho TK1 (Ser13) Antibody人腎小球組織糖基化終末產(chǎn)物(GTE-AGE)
藍色犁頭霉小鼠β淀粉樣蛋白Anti-Phospho TOB1 (S164) Antibody人尿蛋白(UP)
Nocardioides salarius 人角蛋白19Anti-Phospho TNNI3 (Ser43) Antibody人尿蛋白(UP)
纖維單胞菌屬大鼠低氧誘導因子1αAnti-Phospho TP53 (Ser392) Antibody人低分子質(zhì)量蛋白7/β型蛋白體9(LMP7/PSMB9)
澳大亞莢孢腔菌小鼠白介8Anti-Phospho TPH1 (Ser260) Antibody人低分子質(zhì)量蛋白7/β型蛋白體9(LMP7/PSMB9)
樟疫霉小鼠周期D3Anti-Phospho TPH1 (Ser58) Antibody人α2巨球蛋白(α2-MG)
聚生殼菌大鼠胰淀Anti-Phospho XIRP1 (Ser295) Antibody人α2巨球蛋白(α2-MG)
凍土毛霉人角蛋白18Anti-Phospho-ASAP1 Y782 Antibody人腎損傷分子1(Kim-1)
香蕉人嗜鉻蛋白AAnti-Phospho ZNF598 (Tyr306) Antibody人腎損傷分子1(Kim-1)
釀酒酵母大鼠白三烯C4Anti-Phospho-CaM Kinase II (Thr286) Antibody人水通道蛋白5(AQP-5)
干草寒冷桿菌小鼠周期D2Anti-Phospho-Aurora B pT232 Antibody人水通道蛋白5(AQP-5)
MAPK調(diào)控蛋白TRB2抗體茶褐斑盤多毛孢小鼠纖維肉瘤細胞
腦源性tau蛋白激抗體茶盤多毛孢KM小鼠子宮頸癌瘤株
基移換樣蛋白1抗體茶莖點霉小鼠單核細胞巨噬細胞
膜型絲蛋白2抗體桑生殼針孢原代人皮膚黑色細胞
B-Raf抑制劑(GDC-0879)銅綠假單胞 蛇床
黑木耳 山柑子堿
云芝栓孔 櫻草
平凡假單胞 蓽茇酰
大腸埃希氏桿 3β-乙?;R墩果酸
大腸埃希 礦物油
Zimmermannella 3-表齊墩果酸
熱帶假絲酵母 甲基小檗堿
櫟生青霉 氧化小檗堿
滑菇 二氫血根堿
芽孢桿屬 2''-O-p-香豆?;登G
柔薄迷孔 2''-O-p-反式香豆?;嚥蒈?/span>
擬盤多毛孢屬 假人參皂苷RT1
無害李斯特氏 α-甘油磷酸鎂鹽
丁香假單胞 Raddeanoside 20
操作規(guī)程
1,、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定),。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2,、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3,、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,,在37℃孵育4小時,,使MTT 還原為甲臜。
6,、吸出上清液,,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻,。
7,、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片),。
8,、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD,。細胞的存活率以T/C%表示,,T 為加藥細胞的OD 值,,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b,、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)