mTOR抑制劑(PP 242)公司*的產(chǎn)品：GFP (Green Fluorecent protein) 綠色熒光蛋白（多肽抗原）G-418 硫鹽 potency: ≥650 μg per mg
EGFP protein/rEGFP/Recombinant EGFP(Enhanced Green Fluorecent protein) 重組增強型綠色熒光蛋白對羥苯 AR,98%
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產(chǎn)品屬性：

中文名稱：mTOR抑制劑(PP 242)

英文名稱：PP 242

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細胞生物學研究有以下幾個方面：

細胞生物學的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細胞核,、染色體以及基因表達的研究；

②生物膜與細胞器的研究,；

③細胞骨架體系的研究,；

④細胞增殖及其調控；

⑤細胞分化及其調控,；

⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡),；

⑦細胞的起源與進化；

⑧細胞工程.

實驗報告：

一,、分離與培養(yǎng)：

1,、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，最后將1mm3左右大?。?/span>

2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細胞懸液,，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；

3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s,，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次,，直至組織*被消化,；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,，1200r/min 離心10min,，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；

5,、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基,，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；

二、免疫熒光鑒定：

1,、待心房肌細胞生長至80%融合時,，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次,，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2,、PBS沖洗細胞2次,，每次10min，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min,；

3,、PBS沖洗細胞2次，每次10min,，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細胞30min；

4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5,、PBS沖洗細胞3次，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h；

6,、用PBS沖洗3次,，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。

假單胞菌熱休克蛋白-60抗體Human SUMO2/3 ELISA Kit大鼠還原(GR)免疫試劑盒

洋蔥伯克霍爾德氏菌熱休克蛋白-70抗體Human SUN1 ELISA Kit大鼠過氧化物(GSH-PX)免疫試劑盒

不等彎孢熱休克蛋白90α抗體Human SUOX ELISA Kit大鼠S轉移θ1(GSTT1)免疫試劑盒

根瘤菌熱休克蛋白90β/HSP90 β 抗體Human SYCE1 ELISA Kit大鼠S轉移P(GSTP1)免疫試劑盒

薔薇放線孢*人巨病UL23抗體Human STT3A ELISA Kit大鼠S轉移Mu1(GSTM1)免疫試劑盒

頂孢頭孢霉HECA蛋白抗體Human SUPT16H ELISA Kit大鼠S轉移(GSTs)免疫試劑盒

香菇異質核糖核蛋白hnRNPA2抗體Human STT3B ELISA Kit大鼠(GSH)免疫試劑盒

齊藤假絲酵母異質核糖核蛋白U抗體Human STXBP2 ELISA Kit大鼠谷酰合成(GLUL)免疫試劑盒

巨大芽胞桿菌人類狀瘤病16/18 E6抗體Human STXBP1(Syntaxin-binding protein 1) ELISA Kit大鼠谷酰(Gln)免疫試劑盒

木賊鐮孢HA tag標簽抗體Human STXBP3 ELISA Kit大鼠谷脫羧自身抗體IgM(GAD-Ab-IgM)免疫試劑盒

克雷伯氏菌屬荷爾蒙敏感脂肪抗體Human STXBP4 ELISA Kit大鼠谷脫羧自身抗體IgG(GAD-Ab-IgG)免疫試劑盒

大腸菌群質控樣品血紅蛋白α1/α-Globin抗體Human IFI6(Interferon alpha-inducible protein 6) ELISA Kit大鼠谷脫羧1(GAD1)免疫試劑盒

德爾布有孢酵母Fas相互作用蛋白激2抗體Human STXBP5 ELISA Kit大鼠谷脫氫(GDH/GLDH)免疫試劑盒

葡萄座腔菌Fas相互作用蛋白激3抗體Human STOML2(Stomatin-like protein 2) ELISA Kit大鼠谷免疫試劑盒

乳乳球菌乳亞種人類皰疹病8抗體Human STXBP6 ELISA Kit大鼠孤腓肽(OFQ/N)免疫試劑盒

根瘤菌磷化熱休克蛋白27抗體Human SUFU ELISA Kit大鼠鉤端螺旋體IgG(Leptospira IgG)免疫試劑盒

傳染性法氏囊病病毒Avibirnavirus│Infectious bursal disease virus 質量規(guī)格：standard for GC,≥99.6%(GC)朝藿定A1

小單孢菌屬Micromonospora│sp. 質量規(guī)格：Standard for GC, ≥99.5% (GC)黃柏堿

鹽棲鹽田菌Salinicola│salarius 質量規(guī)格：standard for GC,≥99.0%(GC)京尼平
mTOR抑制劑(PP 242)構巢曲霉 BIS-TRIS 鹽酸鹽傳染性貧血抗體Elisa

傳染性喉氣管炎病 2,2'-二喹啉-4,4'-二羧酸前列腺F2αElisa

鏈霉 N-Boc-4-甲酸甲酯鼻疽Elisa

波羅的海西瓦氏 正壬布魯氏Elisa

短小芽孢桿 2-氟-3(三氟甲基)苯傳染性鼻肺炎Elisa

枯草芽孢桿 脫乙酰殼多糖溶Elisa

熱淀粉鏈霉 N-Boc-4-甲弓形蟲IgGElisa

慢生根瘤 N,N′-二苯基-N,N′-(1-萘基)-1,1′-聯(lián)苯-4,4′-二褪黑Elisa

pMD2.G 4-溴-2,6-二氟苯多巴Elisa

日本山茶盤孢 2,6-二氟-4-甲氧基色CElisa

微小桿 2,6-二氟-4-羥基苯CD40配體Elisa

節(jié)桿 乙酰酸皮質Elisa

水稻漢納酵母 (R)-(-)-4-磺酸縮水甘油酯前列腺E2Elisa

米根霉 己酸烯酯I型膠原蛋白Elisa

玫紅假裸囊 己酸乙酯雌三Elisa 

操作規(guī)程

1,、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目,，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）,。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2,、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。

3,、將96孔板在37℃,，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。

4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,，在37℃孵育4小時,，使MTT 還原為甲臜。

6,、吸出上清液,，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻,。

7,、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片,，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8,、結果分析

a,、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,，無細胞）,，各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,，T 為加藥細胞的OD 值,，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100

b,、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)