公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究,;
②生物膜與細(xì)胞器的研究,;
③細(xì)胞骨架體系的研究,;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控,;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡),;
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:Rev-erbα激動(dòng)劑(GSK4112)
英文名稱:GSK4112
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
GSK4112是一種Rev-erbα激動(dòng)劑,EC50為0.4μM,GSK4112是小分子化學(xué)探針,用于核血紅素受體REV-erbα的細(xì)胞生物學(xué)研究,。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1216744-19-2 別名:SR6452 純度:98.0% 分子式:C??H??ClN?O?S 分子量:396.89 儲(chǔ)存條件:-20℃,,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一,、分離與培養(yǎng):
1,、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大小,;
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5,、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,;
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h,;
6,、用PBS沖洗3次,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定),。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2,、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3,、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,,在37℃孵育4小時(shí),,使MTT 還原為甲臜。
6,、吸出上清液,,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻,。
7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片),。
8,、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD,。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值,。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b,、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
巨獸芽孢桿菌通用轉(zhuǎn)錄因子2H肽1抗體Human DCT(L-dopachrome tautomerase) ELISA Kit大鼠髓過氧化物特異性抗中性粒胞質(zhì)抗體IgG(MPO-ANCA IgG)免疫試劑盒
假單胞菌屬甘油激抗體Human TREML4 ELISA Kit大鼠髓過氧化物(MPO)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌線粒體甘油三磷脫氫2抗體Human TRAPB/SSR2 ELISA Kit大鼠性磷(ACP)免疫試劑盒
Nocardia谷酰合成/谷連接抗體Human TRAPA/SSR1 ELISA Kit大鼠性成纖維生長(zhǎng)因子(aFGF/FGF-1)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌甘油三磷脫氫1抗體Human TRADD ELISA Kit大鼠性β葡萄糖苷(GBA)免疫試劑盒
多粘類芽孢桿菌神經(jīng)節(jié)苷酯抗體Human TRAIP ELISA Kit大鼠松弛肽/松弛1(RLN1)免疫試劑盒
膠孢谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移A3抗體Human TPTE ELISA Kit大鼠絲裂原激活的蛋白激1/MAP激1(MAPK1)免疫試劑盒
葡萄座腔菌磷化GADD153抗體Human TRAK2 ELISA Kit大鼠絲蛋白抑制劑alpha-1 免疫試劑盒
球孢白僵菌G蛋白αS抗體(嘌呤核苷結(jié)合蛋白Gα s)Human CD69(Early activation antigen CD69) ELISA Kit大鼠水閘蛋白1(Cldn1)免疫試劑盒
副豬嗜血桿菌G蛋白β4抗體/嘌呤核苷結(jié)合蛋白β亞基4Human TRAM1 ELISA Kit大鼠水通道蛋白5(AQP-5)免疫試劑盒
苔蘚隱球酵母G蛋白β2抗體/嘌呤核苷結(jié)合蛋白β亞基2Human TRAM2 ELISA Kit大鼠水通道蛋白4(AQP-4)免疫試劑盒
米曲霉疏展變種G蛋白γ2抗體/嘌呤核苷結(jié)合蛋白γ2抗體Human TPX2 ELISA Kit大鼠水通道蛋白3(AQP-3)免疫試劑盒
冷桿菌屬磷化糖原合激3β抗體Human TPTE2 ELISA Kit大鼠水通道蛋白2(AQP-2)免疫試劑盒
猴頭菇G蛋白偶聯(lián)受體GPR92蛋白抗體Human TRA2A ELISA Kit大鼠水通道蛋白1(AQP-1)免疫試劑盒
忍冬黑痣菌己糖6磷脫氫抗體Human TR2IT1 ELISA Kit大鼠水通道蛋白0(AQP-0)免疫試劑盒
污黑腐皮殼G蛋白偶聯(lián)受體γ14抗體Human TRIP6 ELISA Kit大鼠雙氫睪(DHT)免疫試劑盒
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格:3000(5um)千層紙A-7-0-β-D-葡萄糖苷
海旋菌Thalassospira│sp. 質(zhì)量規(guī)格:6000(3.5um)漢黃芩苷
小麥蒼白桿菌Ochrobactrum│tritici 質(zhì)量規(guī)格:醫(yī)藥級(jí)氫東莨菪堿
Rev-erbα激動(dòng)劑(GSK4112)扁蓄苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Iohexol口蹄疫病A型抗體(N端)包裝25g
表白樺脂(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Maltose Phosphorylase 5U/mg腎刷狀緣抗體包裝500g
表兒茶(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: MetribuzinFLAG Tag標(biāo)簽抗體(N端)包裝5g
表兒茶沒食子酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: MU-alpha-GALFAM166A蛋白抗體包裝100g
表告依春(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Mucic acid脂肪合成抗體包裝25g
表戈米辛O(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Naphthol AS-MX phosphate腦型脂肪結(jié)合蛋白抗體(C端)包裝5g
表沒食子兒茶(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Potassium oxalate, monohydrate磷化纖維束蛋白同源物1抗體包裝1g
表沒食子兒茶沒食子酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sodium bitartrate, monohydrate粘著斑激抗體包裝5g
表木栓(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sodium sulfate, decahydrate5抗體包裝100mg
表小檗堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Span* 40成纖維生長(zhǎng)因子10抗體包裝1g
別隱品堿;A-別隱品堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tyramine hydrochlorideXIAP相關(guān)因子1凋亡抑制蛋白抗體包裝250mg
濱蒿內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 2-Furoic acid羊抗人纖維蛋白原抗體包裝1g
檳榔(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 2-MethylimidazoleFas活化激結(jié)構(gòu)域蛋白5抗體包裝250mg
檳榔花(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 6-ChloropurineF-box蛋白38抗體包裝100g
波棱瓜子(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Big CHAPFK506結(jié)合蛋白38抗體包裝25g