Raf激酶抑制劑(RAF709)公司正在出售的產(chǎn)品：CD68/FITC 熒光標(biāo)記CD68抗體IgGDL-賴氨 99%
CD69/CLEC2C/AIM/FITC 熒光標(biāo)記活化誘導(dǎo)分子CD69抗體IgGDL-色氨 99%
CD73/FITC 熒光標(biāo)記胞漿-5´-核苷-Ⅱ抗體IgG3- 98%
CD79A/IGBP-1 /FITC 熒光標(biāo)記免疫球蛋白結(jié)合蛋白-1抗體IgG二酰 97%
B7-1/

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO),，90%,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37℃,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存,。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍,，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM,，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）,。

2) 對于懸浮細(xì)胞,，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞,，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,，胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),，加入細(xì)胞培養(yǎng)液,，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),，500-1000g離心5min收集細(xì)胞,。

3) 收集細(xì)胞后,，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞,，共洗滌兩次,。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞,，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml,。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,，輕輕混勻,，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后,，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時(shí)內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞,、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對照組,，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot）,，F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo),。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片,，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI,。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán),。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色,，膜上有綠色光環(huán),。
柱孢菌屬p27(抗原)Anti-GCHFR Antibody人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)

Enterobacter sichuanensisP63 腫瘤抑制基因（抗原）Anti-GCLM Antibody人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)

皺折裸胞殼護(hù)骨(多肽抗原)Anti-GCNT6 Antibody人幽門螺桿菌相關(guān)基因蛋白A-IgG(HP-CagA-IgG)

解淀粉芽孢桿菌骨保護(hù)蛋白配體(抗原)Anti-GDF15 Antibody人幽門螺桿菌相關(guān)基因蛋白A-IgG(HP-CagA-IgG)

蘇云金芽胞桿菌增生性瘢痕相關(guān)蛋白（抗原）Anti-GCNT7 Antibody人粘蛋白/粘液7(MUC7)

三葉草根瘤菌多腺苷二磷多聚抗原Anti-GDF1 Antibody人粘蛋白/粘液7(MUC7)

草假單胞菌內(nèi)脂/內(nèi)臟脂肪（人：N端多肽）、內(nèi)臟脂肪,、 又稱：前B克增強(qiáng)因子,、內(nèi)肥、腹脂Anti-GDF5 Antibody人轉(zhuǎn)谷酰2C多肽(TGM2)

灰色鏈霉菌內(nèi)脂/內(nèi)臟脂肪Anti-GDF3 Antibody人轉(zhuǎn)谷酰2C多肽(TGM2)

Streptomyces內(nèi)脂/B克增強(qiáng)因子Anti-GDF6 Antibody人Ⅰ型前膠原N端前肽(PⅠNP)

蘋果黑腐皮殼菌色上皮源性因子(多肽抗原）Anti-GDF2 Antibody人Ⅰ型前膠原N端前肽(PⅠNP)

假單胞菌屬磷脂磷2C（抗原）Anti-GDF7 Antibody人Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(ⅠCTP)

產(chǎn)凍膠菌腸道肽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(小肽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白)多肽Anti-GDI1 Antibody人Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(ⅠCTP)

出芽短梗霉一種腫瘤抑制基因抗原Anti-GFER Antibody人Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)

墳?zāi)构?jié)桿菌孕激誘導(dǎo)阻斷因子(抗原)Anti-GDI2 Antibody人Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)

根瘤菌piwi 樣1蛋白(抗原)Anti-GFM2 Antibody人粘蛋白/粘液5AC(MUC5AC)

枯草芽孢桿菌過氧化活化增生受體γ（抗原）Anti-GGA1 Antibody人粘蛋白/粘液5AC(MUC5AC)

Saitohin蛋白抗體木霉屬人結(jié)腸癌細(xì)胞

線粒體琥珀脫氫D抗體蠟狀芽孢桿菌人回盲腸癌細(xì)胞

超氧化物歧化4抗體霍氏腸桿菌人慢性髓原白血病細(xì)胞

沉默調(diào)節(jié)相關(guān)蛋白6抗體大腸埃希氏菌人乳腺浸潤性導(dǎo)管癌旁皮膚細(xì)胞
Raf激酶抑制劑(RAF709)大豆慢生根瘤 對羥基

罕見沃特斯氏 3,4-乙烯二氧噻吩

柔嫩艾耳球蟲 滑石粉

梭屬 綠原酸

考克氏屬 8-羥基-7--5-喹啉磺酸

黑腐皮殼屬 N-羥基硫代琥珀酰亞

蘇云金芽孢桿 聚茴腦磺酸鈉

芽胞桿 聚對烯基茴香鈉

豇豆慢生根瘤 順烏頭酸

植物乳桿植物亞種 4-甲

表皮葡萄球 聚乙二350單甲

鏈霉 四丁基氟化三水合物

瑞士乳桿 胡椒堿

孟氏假單胞 高溫油脂III

糙皮側(cè)耳 棕櫚酸對酯