商品介紹:
Dapivirine(TMC120,TMC120R147681)是HIV非核苷逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑(NNRTI),IC50為24nM,,能抑制包括NNRTI抗性的各種HIV-1毒株。 注:本品僅可用于科研實驗,,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號:244767-67-7 別名:TMC120;R147681 純度:99.15% 分子量:329.4 儲存條件:-20℃,,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用,。 |
以下是細胞生物學(xué)試劑的詳細介紹:
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水),。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞,。
對于貼壁細胞,,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,,離心收集細胞,共洗滌兩次,。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml,。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,,室溫避光孵育15min,。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測),。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,,正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置,。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),,F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),,PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,,活細胞僅有很低強度的背景熒光,,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察,。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI,。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,,細胞核顯示紅色,,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%,。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%,;二氧化碳,,5%。 溫度:37℃,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度,。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
小白菊內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Carbocistein;S-Carboxymethyl-L-cysteine乙型肝炎病X蛋白相互作用蛋白包裝100g
小駁骨(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: S-Benzyl-L-cysteine組蛋白H2B.s抗體包裝25g
小檗紅堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: L-Glutamic acid hydrochloride組蛋白去乙?;?+5+9抗體包裝5g
小檗堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Nω-Nitro-L-arginine熱休克蛋白27相關(guān)蛋白1抗體包裝25g
小檗皮(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Nalpha-Benzoyl-L-arginine卟膽原脫抗體包裝5g
小豆蔻明(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: L-Asparagine Anhydrous異質(zhì)核糖核蛋白U2樣蛋白抗體包裝25g
小茴香(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: L-Asparagine anhydrous肝癌衍生生長因子2抗體包裝5g
小薊(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: N'-Trityl-L-asparagine肝癌相關(guān)抗原57抗體包裝1g
小秦艽(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: L-Aspartic Acid 1-Benzyl Ester補體C3抗體包裝5g
小葉榕(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: L-Aspartic acid 1-methyl ester型流感病血凝抗體包裝25ml
纈草三酯英文名稱: L-Aspartic acid β-methyl ester hydrochloride狀旁腺功能亢進蛋白2/分裂周期73抗體包裝5ml
薤白(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: S-Methyl-L-cysteine線粒體絲蛋白抗體包裝100g
辛弗林(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: S-Trityl-L-cysteine/鈉超化激活環(huán)核苷門控通道蛋白2抗體包裝25g
辛弗林鹽鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: L-Glutamic Acid 1-Methyl Ester熱休克蛋白β7抗體包裝5g
辛辣內(nèi)酯A(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: L-Glutamic acid diethyl ester hydrochloride/鈉超化激活環(huán)核苷門控通道蛋白3抗體包裝1ml
平常假絲酵母Candida│inconspicus 質(zhì)量規(guī)格:≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品用于含量測定梅螺旋體試劑盒雷公藤;Triptolide
大麗花輪枝孢(棉花黃萎病菌)Verticillium│dahliae 質(zhì)量規(guī)格:≥98.5%,BR,二合物梅螺旋體試劑盒雷公藤紅;Celastrol
長裙竹蓀Dictyophora│indusiata 質(zhì)量規(guī)格:純度>99%,BR,可用于培養(yǎng)錨蛋白B試劑盒落新婦苷;Astilbin
NNRTI抑制劑(Dapivirine)異丁香酚乙酯Human
異東莨菪內(nèi)酯;異莨菪亭(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
異莪術(shù)烯Human, Mouse
異佛手柑內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse
異佛司可林(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse
異甘草苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
異甘草(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse
異橄欖樹脂Human, Mouse
異杠柳苷;杠柳苷元-3-O-β -葡萄糖(1-4)-...Human