激酶抑制劑（2,4-Pyrimidinediamine）公司正在出售的產(chǎn)品：Anti-PI3K p85 (Tyr458)/p55 (Tyr199) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化磷脂酰肌醇激酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rabbit Anti-human IgGF(ab')2 兔抗人IgGF(ab')2 (親和層析純化)Multi-class antib

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO),，90%,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37℃,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存,。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍,，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

對(duì)于懸浮細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM,，常溫條件下離心5分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無(wú)菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,，500-1000g離心5min收集細(xì)胞,。

對(duì)于貼壁細(xì)胞,，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后,，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次,。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml,。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中,，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻,，室溫避光孵育15min,。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）,。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置,。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot）,，F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片,，顯微鏡下觀察,。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán),。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán),。

小鼠組織因子通道抑制因子(TFPI)ELISA試劑盒 ,，英文名： TFPI ELISA Kit

鴨白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA檢測(cè)試劑盒DuckIerleukin-8,IL-8ELISAKit 96T/48T

犬游離三碘甲狀腺原氨酸(Free-T3)免疫試劑盒 Canine Free i-iodothyronine Indes,Free-T3 ELISA Kit

英文名稱MouseBLC-1/CXCL13ELISAKit小鼠B-淋巴細(xì)胞趨化因子1(BLC-1/CXCL13)規(guī)格：96T/48T

冰凍切片組織線粒體膜通道孔(MPTP)熒光檢測(cè)試劑盒50次

RatFactor-relatedApoptosisligand,FASLELISA試劑盒大鼠凋亡相關(guān)因子配體(FASL)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠白介素34(IL34)ELISA試劑盒 ,，英文名： IL34 ELISA Kit

人降解加速因子(DAF)ELISA檢測(cè)試劑盒Humandecay-acceleratingfactor,DAFELISAKit 96T/48T

大鼠抗甲狀腺素(T4)抗體(IgG)免疫試劑盒 Rat ai-thyroxine(T4)aibody IgG ELISA kit

英文名稱RatHighsensitivityC-ReactiveProteinELISA大鼠超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)規(guī)格：96T/48T

酒類(lèi)D-乳酸比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

ELISAKitHCgp-39人軟骨糖蛋白39規(guī)格：48T/96T

豬主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(lèi)(MHCⅢ/SLAⅢ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human ribonuclease (RNASE) ELISA Kit 人核糖核酸酶(RNASE)ELISA試劑盒

RabbitAi-SmoothMuscleAibody,ASMAELISAKit 兔抗平滑肌抗體(ASMA)ELISA試劑盒 96T/48T 分裝

CLIAKitforApo-E(RabbitApolipoproteinE)ELISAKit兔載脂蛋白E規(guī)格：48T/96T

血紅細(xì)胞直接溶解液500毫升

Porcinemacrophageinflammatoryprotein1α,MIP-1αELISAKit豬巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
激酶抑制劑（2,4-Pyrimidinediamine）Phospho-Smad1/5 (Ser463 + Ser465) 英文名稱： 磷酸化細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子Smad-1/5抗體 0.1ml

phospho-Estrogen Receptor beta (Ser87) 英文名稱： 磷酸化雌激素受體β抗體 0.1ml

孕激素受體抗體 Anti-PR 0.2ml

Anti-Phospho-Syk (Tyr525/526) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化非受體型酪氨酸蛋白激酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-MLF1 Interacting Protein/PBIP1(Thr78) 磷酸化卡波西氏肉瘤皰疹病毒潛伏核抗原相互作用蛋白1抗體 規(guī)格 0.1ml

HCV-Core 丙型肝炎病毒-C區(qū)(多肽)Multi-class antibodies規(guī)格： 1mg