MAP2K1/MEK1抑制劑(RO4987655)公司*的產(chǎn)品：Phospho-PKR (Thr446) /FITC 熒光標(biāo)記化蛋白激R抗體IgG
Phospho-PKR (Thr451) /FITC 熒光標(biāo)記化蛋白激R抗體IgG
Phospho-PKR (Thr446/451) /FITC 熒光標(biāo)記化蛋白激R抗體IgG
Phospho-PRK1 (Thr774)/PRK2 (Thr8

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：MAP2K1/MEK1抑制劑(RO4987655)

英文名稱：RO4987655

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究,；

②生物膜與細(xì)胞器的研究,；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控,；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控,；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化,；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一,、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，最后將1mm3左右大小,；

2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s,，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s,，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化；

4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,，1200r/min 離心10min，棄去上清,，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；

5、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基,，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二,、免疫熒光鑒定：

1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,；

2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min,；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min,；

4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h,；

6,、用PBS沖洗3次，每次10min,，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。

多黏類芽孢桿菌Escherichia coli大鼠血小板生成(TPO)

康寧木霉Escherichia coli大鼠可溶性凋亡相關(guān)因子(sFAS/Apo-1)

Paenibacillus agarexedensEscherichia coli大鼠可溶性凋亡相關(guān)因子(sFAS/Apo-1)

產(chǎn)氣莢膜梭菌       C型Escherichia coli大鼠Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)

桔青霉Escherichia coli大鼠Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)

菌種中心 生活飲用水總大腸菌群質(zhì)控樣品（多管發(fā)酵法）Escherichia coli大鼠甘露糖結(jié)合蛋白/甘露糖結(jié)合凝集(MBP/MBL)

樟疫霉Escherichia coli大鼠甘露糖結(jié)合蛋白/甘露糖結(jié)合凝集(MBP/MBL)

蘇云金芽孢桿菌Escherichia coli大鼠白介7(IL-7)

雅致放射毛霉Escherichia coli大鼠白介7(IL-7)

裂褶菌Escherichia coli大鼠絲/蘇蛋白磷(STK)

魯考弗奇酵母Escherichia coli大鼠絲/蘇蛋白磷(STK)

類諾氏菌Escherichia coli大鼠抗紅抗體(RBC)

動(dòng)球菌Escherichia coli大鼠抗紅抗體(RBC)

巴斯德畢赤酵母Escherichia coli大鼠CD3分子(CD3)

孢小克銀漢霉輪生變種Escherichia coli大鼠CD3分子(CD3)

蘇云金芽孢桿菌云南亞種Escherichia coli大鼠c-Jun基末端激(JNK)

富含亮重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體雜色尾孢草魚腎細(xì)胞

孤兒核受體TAK1抗體貝倫格葡萄座腔菌大鼠脊髓背角神經(jīng)細(xì)胞

核仁磷蛋白抗體北方蜜環(huán)菌人腎皮質(zhì)曲小管上皮細(xì)胞

嗜中性粒細(xì)胞胞漿因子4抗體粉紅聚端孢霉PG13 逆轉(zhuǎn)錄病毒包被的TK-NIH3T3細(xì)胞
MAP2K1/MEK1抑制劑(RO4987655)高盧蜜環(huán) XLD培養(yǎng)基

雜色曲霉原變種 對(duì)羥基

球孢白僵 GN增液

植物乳桿植物亞種 對(duì)羥基苯甲

污水德沃斯氏 靛玉紅

類干酪乳桿 衛(wèi)矛半固體瓊脂

豌豆根瘤 茶黃-3'-沒食子酸酯

枯草芽孢桿 二酸鈉培養(yǎng)基

糞腸球 V-P半固體瓊脂

膜醭畢赤酵母 40%尿水

松林小牛肝 尿瓊脂基礎(chǔ)

節(jié)桿 尿瓊脂基礎(chǔ)

淡紫擬青霉 茶黃-3-沒食子酸酯

葡枝根霉 HE瓊脂（HE）

枯草芽孢桿 茶黃 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小,，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）,。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物,。

3,、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間,。

4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5,、每孔加50μL 1× MTT 溶液,，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜,。

6,、吸出上清液,，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻,。

7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）,。

8,、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT,，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD,。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值,。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b,、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)