以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
商品介紹:
C75trans是C75的trans形式,,C75是脂肪酸合成酶FASN有效抑制劑,。 注:本品僅可用于科研實驗,,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號:191282-48-1 別名:C 75 trC-75 trans-racemic;trans-C75 純度:99.86% 分子量:254.32 儲存條件:-20℃,,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),,90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%,。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%;二氧化碳,,5%,。 溫度:37℃,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存,。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細胞密度,。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng),。
對于懸浮細胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,,常溫條件下離心5分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,,500-1000g離心5min收集細胞,。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,,胰酶消化時間不宜過長或過短,,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,,將細胞輕輕吹打下來,,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細胞,。
3) 收集細胞后,,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,,共洗滌兩次,。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,,使細胞濃度達到1×106 cell/ml,。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,,室溫避光孵育15min,。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導的正常細胞,、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,,正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析,,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),,F(xiàn)ITC為橫坐標,PI為縱坐標,。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光,。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察,。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI,。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,,細胞核顯示紅色,,膜上有綠色光環(huán)。
解脂亞羅酵母周期D2抗原Anti-CENPQ Antibody人原鈣黏1(PCDH1)
地衣芽孢桿菌周期D3抗原Anti-CENPU Antibody人原鈣黏1(PCDH1)
竹針孢座囊菌色P450 3A4抗原Anti-CEP135 Antibody人白介2受體(IL-2R)
水稻節(jié)桿菌富半胱肝結(jié)合蛋白61抗原Anti-CEP131 Antibody人白介2受體(IL-2R)
砷,、銻,、鉍、汞,、銀化物檢測試劑 人巨病UL23抗原Anti-CEP135 Antibody人皮膚T虜獲趨化因子(CTACK/CCL27)
大腸埃希氏菌多巴受體-D1抗原Anti-CEP152 Antibody人皮膚T虜獲趨化因子(CTACK/CCL27)
黑木耳多巴受體-D3抗原Anti-CEP170 Antibody人胸腎表達趨化因子(BRAK/CXCL14)
葡萄座腔菌多巴受體-D4抗原Anti-CEP152 Antibody人胸腎表達趨化因子(BRAK/CXCL14)
毛束霉多巴受體-D5抗原Anti-CEP170 Antibody人B-淋巴趨化因子1(BLC-1/CXCL13)
油菜菌核病菌多巴β羥化(抗原)Anti-CEP290 Antibody人B-淋巴趨化因子1(BLC-1/CXCL13)
地星結(jié)直腸癌缺失基因抗原Anti-CEP290 Antibody人結(jié)締組織活化肽Ⅲ(CTAPⅢ)
鹽沼鹽桿菌雙皮質(zhì)抗原Anti-CEP350 Antibody人結(jié)締組織活化肽Ⅲ(CTAPⅢ)
根桿菌屬損傷DNA結(jié)合蛋白2抗原Anti-CEP57 Antibody人免疫球蛋白A Fc段受體Ⅰ(FcαRⅠ/CD89)
樟疫霉*防御β1抗原Anti-CEP55 Antibody人免疫球蛋白A Fc段受體Ⅰ(FcαRⅠ/CD89)
釀酒酵母防御β1抗原(人)Anti-CEP78 Antibody人免疫球蛋白E Fc段受體Ⅱ(FcεRⅡ/CD23)
pIB139防御β2抗原(小鼠)Anti-CEP95 Antibody人免疫球蛋白E Fc段受體Ⅱ(FcεRⅡ/CD23)
前列環(huán)受體抗體變異鏈球菌人卵巢腺癌細胞
磷蛋白聚糖PTPRZ抗體人蒼白桿菌人皮膚鱗狀 細胞癌細胞
神經(jīng)特異蛋白酪磷N5抗體Bacillusvireti人皮膚T淋巴細胞瘤
神經(jīng)細胞突觸蛋白PCLO抗體BacillusdrentensisSD大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞
脂肪酸合成酶FASN有效抑制劑(C75 trans)金黃硬皮馬勃 Dregeoside Aa1
熒光假單胞 Dregeoside A11
玫煙色棒束孢 Dodoviscin A
鏈霉 Dihydromicromelin B
微黃原小單孢 Dihydroepistephamiersine 6-aceta
梨殼針孢 Diacetylpiptocarphol
秀珍菇 Dendocarbin A
枯草芽孢桿 Dehydroheliobuphthalmin
黃棕色鏈霉 Dehydroespeletone
釀酒酵母 去甲氧基去乙酰氧基土槿甲酸 B
牛肝 Daphniyunnine A
吉氏芽孢桿 Daphnilongeranin C
生活飲用水 鎘 Cycloshizukaol A
異常漢遜酵母 Cyclocommunol
枯草芽孢桿 Cyclocerberidol