產(chǎn)品屬性:
中文名稱:PI3K和mTOR抑制劑(NSC781406)
英文名稱:NSC781406
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
NSC781406是高效的PI3K和mTOR抑制劑,,對PI3Kα的IC50值為2nM。 注:本品僅可用于科研實驗,,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號:1676893-24-5 純度:99.55% 分子量:627.68 儲存條件:-20℃,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用,。 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究,;
②生物膜與細胞器的研究,;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調(diào)控,;
⑤細胞分化及其調(diào)控,;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化,;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一,、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大小,;
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,,1200r/min 離心10min,棄去上清,,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二,、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細胞2次,,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min,;
2,、PBS沖洗細胞2次,,每次10min,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3、PBS沖洗細胞2次,,每次10min,,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min,;
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜,;
5,、PBS沖洗細胞3次,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h;
6,、用PBS沖洗3次,,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
小鼠脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)ELISA試劑盒 ,,英文名: LBP ELISA Kit
猴子巨噬細胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA檢測試劑盒MonkeyMacrophageInflammatoryProtein-1α,MIP-1αELISAkit 96T/48T
犬葡萄糖-6-磷酸酶(G6PC)免疫試劑盒 Dog Glucose-6-phosphatase,G6PC ELISA kit
英文名稱HumanAmylinELISAKit人胰淀素(Amylin)規(guī)格:96T/48T
純化大鼠腎上腺髓質(zhì)素(AM)基因重組表達載體(pGEFP-AM)10微克
RatHistoneDeacetylase,HDELISA試劑盒大鼠組織蛋白去乙酰化酶(HD)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠白介素10(IL-10)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat neuroophin 4 (-4) ELISA Kit 大鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子4(-4)ELISA試劑盒
HumanOsteoprotegerinLigand,OPGLELISAKit 人骨保護素配體(OPGL)ELISA試劑盒 96T/48T 分裝
Humancaspaseactivateddeoxyribonuclease,CADELISA試劑盒人胱天蛋白酶激活的脫氧核糖核酸酶(CAD)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
轉(zhuǎn)基因油菜(canola)GT73品系基因檢測試劑盒20次
humansimilaoRIKENcDNA4931408D14geneELISAKit人類似RIKENcDNA4931408D14基因ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
豬高鐵血紅蛋白(MHB)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human tuberculosis aibody IgG (TB-Ab IgG) ELISA Kit 人結(jié)核菌桿抗體IgG(TB-Ab IgG)ELISA試劑盒
PorcineHeatShockProtein90,HSP-90ELISAKit 豬熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒 96T/48T 分裝
CLIAKitforAlpha-EP(HumanAlpha-Endomorphin)ELISAKit人α-內(nèi)肽規(guī)格:48T/96T
血液精氨酸(arginine)含量酶連續(xù)循環(huán)反應(yīng)比色法定量檢測試劑盒20次
Phaseolusvulgarisagglinin,PHAELISAKit菜豆凝集素(PHA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
PI3K和mTOR抑制劑(NSC781406)Sulfatase 2 英文名稱: 酯酶2蛋白抗體 0.2ml
Fbx15 英文名稱: Fbx15蛋白抗體 0.2ml
髓鞘相關(guān)糖蛋白a/b抗體 Anti-MAG-a/b 0.1ml
Anti-RGS2/FITC 熒光素標記G蛋白信號轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-PKA R2 (Ser96) 磷酸化蛋白激酶A受體2α亞基抗體 規(guī)格 0.1ml
IGF-I( Insulin-like Growth Factor-I ) 胰島素樣生長因子-I(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
操作規(guī)程
1,、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定),。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2,、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3,、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,,在37℃孵育4小時,,使MTT 還原為甲臜,。
6、吸出上清液,,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻。
7,、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8,、結(jié)果分析
a,、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,,無細胞),,各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,,T 為加藥細胞的OD 值,,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b,、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)