商品介紹:
DFMTI能夠*阻止rmGlu1L757V谷氨酸反應(yīng),。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號(hào):864864-86-8 別名:MK5435 純度:99.25% 分子量:368.38 儲(chǔ)存條件:-20℃,,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用,。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水),。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞,。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),,加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次,。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml,。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,,室溫避光孵育15min,。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)),。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞,、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置,。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),,PI為縱坐標(biāo),。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察,。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI,。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,,細(xì)胞核顯示紅色,,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),,90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%,。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%;二氧化碳,,5%,。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3)凍存液:90%血清,,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,,液氮儲(chǔ)存,。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,,常溫條件下離心5分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
腦啡肽原B(PDYN)ELISA Kit英文名稱:PDYN ELISA Kit乙脫氫2型抗體包裝5g
腦啡肽原A(PENK)ELISA Kit英文名稱:PENK ELISA Kitγ-基丁脫氫抗體包裝1g
腦腸肽(Gehrelin)ELISA Kit英文名稱:Gehrelin ELISA Kit衰老相關(guān)蛋白5抗體包裝25g
腦腸肽(BGP/Gehrelin)ELISA Kit英文名稱:BGP/Gehrelin ELISA Kit磷化熱休克蛋白β5/αb晶體蛋白質(zhì)/α-晶體蛋白b鏈抗體包裝5g
末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9(TCC C5b-9)ELISA Kit英文名稱:TCC C5b-9 ELISA Kit釉基質(zhì)蛋白抗體包裝1g
膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)ELISA Kit英文名稱:ANX-Ⅴ ELISA Kit磷化腺苷單磷活化蛋白激α2抗體包裝25g
繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激(AMH)ELISA Kit英文名稱:AMH ELISA Kit磷化腺苷單磷活化蛋白激α2抗體包裝5g
苗條受體(LR/Ob-R)ELISA Kit英文名稱:LR/Ob-R ELISA Kit磷化雄激受體抗體包裝1g
免疫球蛋白M(IgM)ELISA Kit英文名稱:IgM ELISA Kit磷化雄激受體抗體包裝5g
免疫球蛋白G4(IgG4)ELISA Kit英文名稱:IgG4 ELISA Kit磷化雄激受體抗體包裝1g
免疫球蛋白G2(IgG2)ELISA Kit英文名稱:IgG2 ELISA Kit磷化雄激受體抗體包裝5g
免疫球蛋白G1(IgG1)ELISA Kit英文名稱:IgG1 ELISA Kit錨定蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白激ANKK1抗體包裝1g
免疫球蛋白G(IgG)ELISA Kit英文名稱:IgG ELISA Kit磷化內(nèi)收蛋白抗體包裝25g
免疫球蛋白E(IgE)ELISA Kit英文名稱:IgE ELISA Kit膜粘連蛋白11抗體包裝5g
免疫球蛋白D(IgD)ELISA Kit英文名稱:IgD ELISA Kit膜粘連蛋白13抗體包裝100mg
肌動(dòng)蛋白α/α-SMA/α Actin抗體免疫球蛋白G(IgG)Torezolid (TR-701; tedizolid) is a novel oxazolidinone for gram-positive infecti
rmGlu1L757V谷氨酸抑制劑(DFMTI)式硝鉍
三鉍
三硝鉍
碳氧鉍
氧化鉍
化鍶
氟化鍶
化鍶
碳鍶