EGFR抑制劑(Cetuximab)公司正在出售的產(chǎn)品：Anti-PEG3/FITC 熒光素標(biāo)記PEG3蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Goat Anti-human Fibrinogen/Gold 金標(biāo)記羊抗人纖維蛋白原(10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格： 2ml
原活化蛋白激酶1/2抗體 Anti-ERK2/ER

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO),，90%,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%,。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%；二氧化碳,，5%,。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。

3）凍存液：90%血清,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存,。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍,，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

對于懸浮細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM,，常溫條件下離心5分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）,。

2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞,。

對于貼壁細(xì)胞,，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時間不宜過長或過短,，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時,，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來,，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,，離心收集細(xì)胞,，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,，重懸細(xì)胞,，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中,，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,，輕輕混勻，室溫避光孵育15min,。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后,，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）,。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞,、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置,。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot）,，F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片,，顯微鏡下觀察,。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán),。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán),。

樟疫霉Burkholderia sacchari

球毛殼菌Burkholderia tropica

乳桿菌屬Burkholderia tuberum

薄花邊傘1-3Burkholderia unamae

空氣藤氏酵母Caldanaerobacter subterraneus subsp. tengcongensis

冷溫木克酵母Caslaniella denitrificans

草木樨中華根瘤菌Caslaniella ginsengisoli

普通青霉Calibacterium aquatile

三葉草根瘤菌Cellulomonas biazotea

橙色棲大理石菌Cellulomonas fimi

長枝被孢霉Cellulomonas flavigena

球孢白僵菌Cellulomonas gelida

硬水黃桿菌Cellulosimicrobium cellulans

薄層菌屬Cellulomonas uda

豬細(xì)小病*Cellulomonas turbata

鏈格孢Cellulosilyticum ruminicola

小鼠幽門螺旋桿菌抗體(IgM)免疫試劑盒銜接蛋白α-Adaptin抗體人多巴D2受體(D2R)番瀉苷元A

小鼠幽門螺旋桿菌抗體(IgG)免疫試劑盒凋亡蛋白活性因子-1抗體（C端）人多巴D2受體(D2R)番瀉苷元B

小鼠印度猬因子(IHH)免疫試劑盒凋亡蛋白活性因子-1抗體（N端）人內(nèi)肽-2(EM-2)反式茴香腦

小鼠2,3-雙加氧1(IDO1)免疫試劑盒三磷腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G超家族成員2抗體人內(nèi)肽-2(EM-2)芳樟
EGFR抑制劑(Cetuximab)ZBTB26 英文名稱： 鋅指蛋白481抗體 0.2ml

DGCR6 英文名稱： 無胸腺癥相關(guān)蛋白DGCR6/迪格奧爾格綜合征關(guān)鍵基因6抗體 0.2ml

銜接蛋白α抗體 Anti-alpha Adaptin/AP1 0.1ml

Anti-Phospho-Torc2/Crtc2 (Ser171)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化CREB轉(zhuǎn)錄共激活因子TORC2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-ERK1(Thr197/Thr202) 磷酸化原活化蛋白激酶1/2抗體 規(guī)格 0.1ml

Defensin Beta2/beta-defensin 2/BD-2(mouse) 防御素β2抗原(小鼠)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg