商品介紹:
Citarinostat是一種特異性的HDAC6抑制劑,抑制HDAC6和HDAC3,IC50值分別為4nM and76nM,。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號(hào):1316215-12-9 別名:ACY241;ACY-241;ACY 241 純度:99.06% 分子量:467.95 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用,。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,,500-1000g離心5min收集細(xì)胞,。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,,胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短,,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次,。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml,。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,,室溫避光孵育15min,。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時(shí)內(nèi)檢測),。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),,F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo),。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),,活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI,。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán),。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,,膜上有綠色光環(huán),。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%,;二氧化碳,,5%。 溫度:37℃,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
指狀青霉人胸腺白血病抗原Anti-Phospho DOK2 (Y299) Antibody人糖原合成激(GSK)
短雙歧桿菌大鼠牛小腸堿性磷Anti-Phospho E2F1 (S364) Antibody人糖原合成激(GSK)
金針菇小鼠促卵泡Anti-Phospho DOK2 (Tyr299) Antibody人胱天蛋白9(Casp-9)
Lysobacter daejeonensis小鼠Ⅰ型前膠原C末端肽Anti-Phospho DUSP1 (Ser296/318) Antibody人胱天蛋白9(Casp-9)
米雷斯戈麥斯氏隱球酵母人腫瘤特異性移植抗原Anti-Phospho EEF1A2 (Ser358) Antibody人胱天蛋白3(Casp-3)
大腸埃希氏菌大鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白AAnti-Phospho EIF2AK3 (T981) Antibody人胱天蛋白3(Casp-3)
瓦爾肯葉菌小鼠脫氧吡啶/脫氧吡啶啉Anti-Phospho ELK1 (Ser383) Antibody彈性蛋白(NE)
中瀨畢赤酵母人足標(biāo)記蛋白/足盂蛋白Anti-Phospho EPB41 (Tyr660) Antibody彈性蛋白(NE)
杏鮑菇大鼠克蛋白Anti-Phospho ECT2 (T790) Antibody人碳酐2(CA-2)
秦氏蜜環(huán)菌大鼠腎上腺Anti-Phospho ELK3 (Ser357) Antibody人碳酐2(CA-2)
皺褶青霉人癌易感蛋白1Anti-Phospho EPS15 (Y849) Antibody人解整合樣金屬蛋白8(ADAM8)
紅酵母屬*小鼠吡啶交聯(lián)物Anti-Phospho EPHB1 (Tyr594/604) Antibody人解整合樣金屬蛋白8(ADAM8)
折疊馬賽菌小鼠骨橋Anti-Phospho ERBIN (Tyr1104) Antibody人髓過氧化物(MPO)
竹喙球菌人T急性淋巴母白血病相關(guān)抗原Anti-Phospho FADD (S194) Antibody人髓過氧化物(MPO)
球孢白僵菌大鼠髓過氧化物特異性抗中性粒胞質(zhì)抗體IgGAnti-Phospho FANCI (Ser556) Antibody人顆粒B(Gzms-B)
哈茨木霉大鼠補(bǔ)體蛋白3Anti-Phospho G3BP1 (S232) Antibody人顆粒B(Gzms-B)
瞬時(shí)受體電位離子通道蛋白/M亞家族抗體假根蘑菇小鼠乳腺癌細(xì)胞 (熒光標(biāo)記)
腫瘤抑制轉(zhuǎn)移候選基因3抗體玫瑰擬層孔菌中國倉鼠卵巢細(xì)胞亞株
TRIM35蛋白抗體鮑姆針層孔菌人結(jié)腸癌肝轉(zhuǎn)移細(xì)胞
p53靶蛋白3抗體氈被孔菌屬大鼠視網(wǎng)膜Muller細(xì)胞
HDAC6抑制劑(Citarinostat)釀酒酵母 1,1-二蒽醌亞
地衣芽孢桿 碳酸環(huán)己
粉紅單端孢霉 4-乙酰苯
類阿達(dá)青霉 N-苯甲酰-N-苯基羥
蛹蟲草 乙?;阴1?/span>
布氏乳桿 乙酰
食用色羅丹明B對(duì)照液 乙
栗色渾圓鏈霉 聯(lián)苯
深黃傘形霉 苯甲酰
枯斑擬盤多毛孢 單磷酸環(huán)己鹽
黑曲霉 1-乙基-3-(3-二甲氨基)碳二亞鹽酸鹽
釀酒酵母 1-(3-二甲基基)-3-乙基碳二亞
迪吉氏黃桿 N,N,N,N-四甲基對(duì)苯二
果生鏈核盤 N,N-二甲基對(duì)苯撐二
釀酒酵母 磷脂酰乙