商品介紹:
Vc-MMAD為抗體偶聯(lián)藥物(ADC),,由Val-Cit作為linker,,連接微管抑制劑MMAD。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號:1401963-17-4 分子量:1369.71 儲存條件:-20℃,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用,。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
MMAD抑制劑(Vc-MMAD) | Vc-MMAD | 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細(xì)胞,,500-1000g離心5min收集細(xì)胞,。
對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,,胰酶消化時間不宜過長或過短,,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時,加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次,。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml,。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,,室溫避光孵育15min,。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測),。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置,。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),,F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),,PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,,活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,,顯微鏡下觀察,。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán),。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán),。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%,。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%;二氧化碳,,5%,。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3)凍存液:90%血清,,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,,液氮儲存,。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
Ⅷ(FⅧ)ELISA Kit英文名稱:FⅧ ELISA Kit銜接蛋白β抗體包裝1g
Ⅶ(FⅦ)ELISA Kit英文名稱:FⅦ ELISA Kit銜接蛋白γ/γ-Adaptin抗體包裝250mg
Ⅵ(FⅥ)ELISA Kit英文名稱:FⅥ ELISA Kit通道蛋白-9抗體包裝5g
Ⅴ(FⅤ)ELISA Kit英文名稱:FⅤ ELISA Kit膜粘連蛋白A3抗體包裝1g
Ⅳ(FⅣ)ELISA Kit英文名稱:FⅣ ELISA Kit膜粘連蛋白 A4抗體包裝50mg
Ⅲ(FⅢ)ELISA Kit英文名稱:FⅢ ELISA Kit自噬相關(guān)蛋白8A抗體包裝1g
Ⅱ(FⅡ)ELISA Kit英文名稱:FⅡ ELISA Kit磷化蛋白激B抗體包裝25g
Ⅰ(FⅠ)ELISA Kit英文名稱:FⅠ ELISA Kit磷化腺苷單磷活化蛋白激α1抗體包裝5g
凝血原片段F1+2(F1+2)ELISA Kit英文名稱:F1+2 ELISA Kit磷化蛋白激B抗體包裝1g
凝血受體(TR)ELISA Kit英文名稱:TR ELISA Kit脫氧胞苷脫蛋白抗體包裝250mg
凝血抗凝血復(fù)合物(TAT)ELISA Kit英文名稱:TAT ELISA Kit蛋白激錨定蛋白13抗體包裝1g
凝溶膠蛋白(Gelsolin)ELISA Kit英文名稱:Gelsolin ELISA KitAP-1μ2抗體包裝5g
尿微量白蛋白(ALB)ELISA Kit英文名稱:ALB ELISA Kit肥大膜抑制性受體Allergin1抗體包裝5g
尿嘧啶核苷磷化1(UPP1)ELISA Kit英文名稱:UPP1 ELISA Kit腦鈉通道蛋白1抗體包裝25MG
尿激型纖溶原激活物受體(PLAUR/uPAR)ELISA Kit英文名稱:PLAUR/uPAR ELISA Kit肌動蛋白相關(guān)蛋白2/3復(fù)合亞單位B1抗體包裝25g
α2巨球蛋白樣蛋白1抗體 α2ML1免疫球蛋白G(IgG)Nintedanib (BIBF 1120) is a potent triple angiokinase inhibitor for VEGFR1/2/3,
MMAD抑制劑(Vc-MMAD)石灰木粉
石絨粉
鈦粉
銅粉
錫粉
鋅氧粉
氧化銅粉
3,3',5,5'-四聯(lián),一水
5-四氮唑,一水