以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
商品介紹:
Lucanthone是Apurinic內(nèi)切核酸酶-1(APE-1)的內(nèi)切核酸酶抑制劑,。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號(hào):479-50-5 分子量:340.48 儲(chǔ)存條件:-20℃,,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用,。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%,。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%,;二氧化碳,,5%。 溫度:37℃,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM,,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水),。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),,加入細(xì)胞培養(yǎng)液,,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),,500-1000g離心5min收集細(xì)胞,。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,,離心收集細(xì)胞,,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,,重懸細(xì)胞,,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,,輕輕混勻,室溫避光孵育15min,。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)),。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞,、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置,。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),,PI為縱坐標(biāo),。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),,活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI,。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán),。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,,膜上有綠色光環(huán),。
缺血修飾白蛋白(IMA)ELISA Kit英文名稱:IMA ELISA Kit絲抑制蛋白激C底物抗體包裝1g
醛固(ALD)ELISA Kit英文名稱:ALD ELISA Kit核突觸蛋白α抗體包裝5g
全段狀旁腺(i-PTH)ELISA Kit英文名稱:i-PTH ELISA Kit自噬相關(guān)蛋白4B抗體包裝500g
去腎上腺(NE)ELISA Kit英文名稱:NE ELISA Kit整合樣金屬蛋白與凝血1型-12抗體包裝10MG
去腎上腺(NA)ELISA Kit英文名稱:NA ELISA Kitα-輔肌動(dòng)蛋白4(內(nèi)參)抗體包裝1g
趨化因子配體1(CCL1)ELISA Kit英文名稱:CCL1 ELISA Kit堿性磷抗體包裝250mg
趨化因子5(CCL5/RANTES)ELISA Kit英文名稱:CCL5/RANTES ELISA KitAU1 tag標(biāo)簽抗體包裝100g
趨化因子(fractalkine/CX3CL1)ELISA Kit英文名稱:fractalkine/CX3CL1 ELISA Kit脂肪增強(qiáng)結(jié)合蛋白1包裝25g
趨化因子(FK)ELISA Kit英文名稱:FK ELISA Kit蛋白激B包裝5g
趨化因子(CC基序)配體2(MRC2)ELISA Kit英文名稱:MRC2 ELISA Kit蛋白激B包裝100g
羥脯(Hyp)ELISA Kit英文名稱:Hyp ELISA Kit血管生成樣蛋白2抗體包裝25g
羥基戊二單酰還原(HMG-CoAR)ELISA Kit英文名稱:HMG-CoAR ELISA Kit血管生成3/血管生成4抗體包裝5g
羥基戊二單酰(HMG-CoA)ELISA Kit英文名稱:HMG-CoA ELISA Kit膜粘連蛋白 I抗體包裝100ml
前心鈉肽(Pro-ANP)ELISA Kit英文名稱:Pro-ANP ELISA Kit膜粘連蛋白 Ⅱ抗體包裝500ml
前列腺特異性抗原(PSA)ELISA Kit英文名稱:PSA ELISA Kit活化轉(zhuǎn)錄因子1抗體包裝1g
雙鏈RNA腺苷脫基抗體(N端)免疫球蛋白M(IgM)CAL-101 (Idelalisib, GS-1101) is a selective p110δ inhibitor with IC50 of 2.5 nM
APE-1抑制劑(Lucanthone)十七酯Human, Mouse
十四1-乙酯Human, Mouse
十四異酯Human, Mouse
視黃乙酯Human
叔丁過(guò)氧化酯Human, Mouse
雙(4-)碳酯Human, Mouse
水楊酯Human, Mouse, Rat
水楊異酯Human
順-6-十八碳烯酯Human