Wnt/β-catenin通路抑制劑(PNU-74654)公司正在出售的產(chǎn)品：phospho-IRS1(Ser1101)/FITC 熒光標記化胰島受體底物-1抗體IgG3-氧烯酯 95%
phospho-IRS1(Ser302) /FITC 熒光標記化胰島受體底物-1抗體IgG酰酯 GR,，99.5%
phospho-IRS1(Ser332/336)/FITC 熒光標記化胰島受體底物-1

以下是細胞生物學試劑的詳細介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37℃,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存,。

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍,，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度,。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞,，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞,，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）,。

2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞,。

對于貼壁細胞,，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短,，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,，加入細胞培養(yǎng)液，將細胞輕輕吹打下來,，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細胞,。

3) 收集細胞后,，加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞,，共洗滌兩次,。

4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞,，使細胞濃度達到1×106 cell/ml,。

5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,，輕輕混勻,，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細胞儀檢測：

染色孵育后,，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）,。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,，正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置,。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot）,，F(xiàn)ITC為橫坐標,，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,，活細胞僅有很低強度的背景熒光,，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光,。

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片,，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI,。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán),。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色,，膜上有綠色光環(huán),。
香菇大鼠白介15Anti-SLC16A3 Antibody人低分子肝(LMWH)

假單胞菌人β乳糖蛋白抗體IgGAnti-SLC18A3 Antibody人補體3裂解產(chǎn)物(C3SP)

大毛霉大鼠白介16Anti-SLC22A18 Antibody人補體3裂解產(chǎn)物(C3SP)

網(wǎng)孢麻孢菌小鼠淋巴功能相關(guān)抗原3Anti-SLC22A6 Antibody人補體片段3b受體(C3bR)

橙蓋傘人抗肌內(nèi)膜抗體IgAAnti-SLC22A18 Antibody人補體片段3b受體(C3bR)

中國油脂酵母小鼠可溶性血小板內(nèi)皮粘附分子1Anti-SLC24A1 Antibody人補體1抑制物抗體(C1INH)

釀酒酵母大鼠白介17Anti-SLC24A3 Antibody人補體1抑制物抗體(C1INH)

淡紫擬青霉人抗糖蛋白抗體Anti-SLC24A4 Antibody人B因子(BF)

葡萄座腔菌大鼠白介1可溶性受體ⅠAnti-SLC24A4 Antibody人B因子(BF)

卵孢白僵菌小鼠骨成型蛋白7Anti-SLC25A21 Antibody人類白抗原G(HLA-G)

金黃色葡萄球菌金黃亞種人抗單核抗體Anti-SLC25A11 Antibody人類白抗原G(HLA-G)

真姬菇人氧化低密度脂蛋白抗體Anti-SLC25A31 Antibody人補體片斷3b(C3b)

阿坎特港富鹽菌大鼠可溶性E選擇Anti-SLC25A12 Antibody人補體片斷3b(C3b)

枯草芽胞桿菌小鼠透明質(zhì)Anti-SLC25A27 Antibody人補體片斷4b(C4b)

地衣芽胞桿菌（未復核可換ACCC06149）大鼠白介1可溶性受體ⅡAnti-SLC25A6 Antibody人補體片斷4b(C4b)

放射形根瘤菌小鼠胰高血糖樣肽1Anti-SLC27A4 Antibody人補體片斷5b(C5b)

四分子交聯(lián)體14抗體四旋蛋白#煙草節(jié)桿菌5-PeS1(2-D8)

酪蛋白硫轉(zhuǎn)移2抗體*槐耳A375sci

睪丸特異絲/蘇激6抗體堅強芽孢桿菌hTSC29

tRNA剪接內(nèi)切2抗體核果褐腐病菌hT279
Wnt/β-catenin通路抑制劑(PNU-74654)凍干粉  大腸埃希氏（定量）  OXi4503

澳型核果褐腐病 L-蛋（甲硫)

食酸 Milataxel

強酒海桿狀 Larotaxel

葡萄炭疽盤孢 多聚右旋賴

類芽胞桿 Karenitecin

德氏乳桿乳亞種 多聚右旋賴

射鱗蘑菇(暫定名) 多聚右旋賴

靈芝(紅芝, 赤芝) DRF-1042

少根根霉原變種 多聚賴

Roseomonas 多聚賴

芽胞桿 DHA-paclitaxel

解脂亞羅酵母 Dapagliflozin

枯草芽孢桿 Celgosivir

小單孢 多聚賴