公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核,、染色體以及基因表達(dá)的研究,;
②生物膜與細(xì)胞器的研究,;
③細(xì)胞骨架體系的研究,;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控,;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控,;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡),;
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱(chēng):TNF-α抑制劑(DCVC)
英文名稱(chēng):DCVC
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
DCVC能抑制病原刺激的TNF-α,。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):13419-46-0 別名:S-[(1E)-1,2-dichloroethenyl]--L-cysteine 純度:99.89% 分子量:216.09 儲(chǔ)存條件:-20℃,,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一,、分離與培養(yǎng):
1,、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大小,;
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化,;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5,、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h,;
6、用PBS沖洗3次,,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1,、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,,需根據(jù)細(xì)胞的大小,,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2,、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物,。
3、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間,。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。
5,、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),,使MTT 還原為甲臜,。
6、吸出上清液,,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻。
7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a,、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),,各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD,。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值,。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
恰米英文名稱(chēng): Glycyrrhizic acid基化樣蛋白11抗體(N端)包裝25g
千層紙A(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Glycyrrhizic acid大腸癌腫瘤突變蛋白抗體包裝100g
千層紙A-7-0-β-D-葡萄糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Glycyrrhizic acid ammonium salt絲/蘇蛋白激MARK4抗體包裝500g
千斤拔(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Glycyrrhizic acid ammonium salt肽解抗體包裝1g
千金藤(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Diammonium Glycyrrhizate磷化絲裂原活化蛋白激激2抗體包裝5g
千金子二萜二乙酰酰酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Diammonium Glycyrrhizate磷化絲裂原活化蛋白激激3抗體包裝25g
千金子L1(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Oleuropein絲裂原活化蛋白激激5抗體包裝5g
千金子L2(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Maackiain磷化絲裂原活化蛋白激激5抗體包裝100g
千里光(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Galangin磷化絲裂原活化蛋白激激5抗體包裝25g
千年?。?biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Homoharringtonine磷化絲裂原活化蛋白激激5抗體包裝1g
牽牛子(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Homovanillic acid磷化絲裂原活化蛋白激激5抗體包裝5g
前杯莧甾英文名稱(chēng): caudatin遷移誘導(dǎo)因子5抗體包裝1mg
前胡(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Griffonilide致癌基因抗體包裝100g
芡實(shí)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Puerarin絲裂原活化蛋白激MAP4K5抗體包裝25g
茜草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): PuerarinMKLN1抗體包裝5g
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:>97%抗紅抗體試劑盒當(dāng)歸酰異五味子O;Angeloylis
耐久腸球菌Enterococcus│durans 質(zhì)量規(guī)格:純度≥98%抗核周因子試劑盒東莨菪苷;Scopolin
大腸埃希菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品抗核小體抗體IgG試劑盒獨(dú)活;Heraclenin
TNF-α抑制劑(DCVC)脂肪炎癥因子Apelin抗原磷啉(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse
Apelin receptor抗原磷吡哆(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse
APG4B自噬相關(guān)抗原磷吡哆丁咯地爾(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse
載脂蛋白A1抗原磷伯安喹(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
凝聚α/β抗原磷川芎(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
胰島受體-α(抗原)磷二氫(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
胰島受體-α(抗原)磷肌鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
胰島受體-β(抗原)磷咯萘啶(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
胰島受體底物-1(抗原)磷喹(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse