PP2A催化亞基抑制劑(Calyculin A)公司*的產(chǎn)品：Kim-1(Human Kidney injury molecule 1) ELISA Kit 人腎損傷分子1硬脂酯 CP,45%（GC）
AQP-5(Human Aquaporin 5) ELISA Kit 人水通道蛋白5硬脂酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99.5% (GC)
AQP-4(Human Aquaporin 4) ELISA

商品介紹：

產(chǎn)品屬性：

中文名稱(chēng)：PP2A催化亞基抑制劑(Calyculin A)

英文名稱(chēng)：Calyculin A

產(chǎn)品規(guī)格：0.5mM*20μL|0.5mM*50μL|0.5mM*200μL

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核,、染色體以及基因表達(dá)的研究,；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究,；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控,；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡),；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化,；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1,、無(wú)菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，最后將1mm3左右大?。?/span>

2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；

3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s,，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化,；

4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min,，棄去上清,，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5,、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；

二,、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min,；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min,；

4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜,；

5,、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h；

6,、用PBS沖洗3次,，每次10min,，最后在倒置熒光顯微鏡下觀(guān)察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1,、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,，需根據(jù)細(xì)胞的大小,，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2,、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物,。

3、將96孔板在37℃,，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間,。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。

5,、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí),，使MTT 還原為甲臜,。

6、吸出上清液,，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,，用平板搖床搖勻。

7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片,，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8,、結(jié)果分析

a,、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,，無(wú)細(xì)胞）,，各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,，T 為加藥細(xì)胞的OD 值,，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b,、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

大腸埃希氏菌Pan ras抗體Anti-CD84 Antibody17-類(lèi)固(17-KS)

解橡膠諾卡氏菌Patched/PTCH抗體Anti-CD86 Antibody17羥孕(17-OHP)

釀酒酵母前列腺E合成抗體Anti-CD86 Antibody(PB0237)17羥皮質(zhì)類(lèi)固(17-OHCS)

假單胞菌屬過(guò)氧化物體增殖物激活受體γ輔激活子1α抗體Anti-CD8A Antibody(PB0235)17-α-羥化(17-α-OH)

腐皮鐮孢絲/蘇蛋白激Plk1抗體Anti-CD8A Antibody16α羥基雌1(16-α OHE-1)

Flavobacterium磷化絲/蘇蛋白激Plk1抗體Anti-CD9 Antibody15脂加氧(15-LO/LOX)

芽胞桿菌屬親環(huán)蛋白（親環(huán)）PPIG抗體Anti-CDA Antibody15-羥基前列腺脫氫(15-PGDH)

釀酒酵母磷化親環(huán)蛋白（親環(huán)）PPIG抗體Anti-CDC123 Antibody15-epi-氧脂 A4(15-epi-LXA4)

釀酒酵母磷化蛋白激AKT底物1抗體Anti-CDC25B Antibody14-3-3蛋白(14-3-3 pro)

 Winogradskyella ulvae磷化內(nèi)分泌腺衍生血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子抗體Anti-CDC20 Antibody14-3-3 蛋白 beta/alpha(YWHAB)

吸水鏈霉菌井崗變種富含脯的酪激2抗體Anti-CDC27 Antibody12-脂氧化/脂加氧(LOX-12)

大西洋假交替單胞菌磷化富含脯的酪激2抗體Anti-CDC25C Antibody12羥二十烷四烯(12-HETE)

淡紫擬青霉磷化富含脯的酪激2抗體Anti-CDC25B Antibody(PB0510)11去氫血栓烷B2(11-DH-TXB2)

嗜鹽動(dòng)性球菌磷化絲/蘇激p90RSK蛋白抗體Anti-CDC25C Antibody11β羥類(lèi)固脫氫1型(11β-HSD1)

巨大芽孢桿菌磷化絲/蘇激p90RSK蛋白抗體Anti-CDC37 Antibody1,5-脫水葡萄糖/1,5-脫水山梨(1,5-AG)

鐮刀菌屬磷化絲/蘇激p90RSK蛋白抗體Anti-CDC37 Antibody1,4,5-三磷肌(IP3)

刺毛殼Chaetomium│spinosum 質(zhì)量規(guī)格：0.98

膠孢Glomerella│cingulata (Stoneman) Spauld. & H. Schrenk 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

海洋副球菌Paracoccus│oceanense 質(zhì)量規(guī)格：0.98
PP2A催化亞基抑制劑(Calyculin A)綠螺球 環(huán)己烷甲α干擾Elisa

蘇云金芽孢桿 1,1,2,2-四氫全氟己基乙型肝炎病1型抗體Elisa

樺褶孔 2-溴苯乙型肝炎病3型抗體Elisa

棲土曲霉 3-(基硅基)磺酸鈉鹽促黃體Elisa

白絲倫茨氏 2-苯乙烯補(bǔ)體3bElisa

香魚(yú)假單胞 3-溴苯乙烯催乳Elisa

*杏葉斑鏈格孢 2-氨乙基嗎啉雌二Elisa

聚生殼 3-苯硫酚抑制AElisa

釀酒酵母 異喹啉-3-羧酸,，一水激活A(yù)Elisa

大腸埃希氏 3,5-二甲基-4-吡唑補(bǔ)體4bElisa

E.coli S17-1（ATCC47055) 米氏酸白介1βElisa

比萊青霉 溴乙縮二乙黃病Elisa

蘋(píng)果鏈格孢 基乙縮二乙坦布蘇病抗體Elisa

柱形德克斯酵母 4-苯鹽酸鹽抗鴨甲肝病A型 1Elisa

大腸埃希 藍(lán)五號(hào)鈉鹽抗鴨甲肝病A型 3Elisa