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JC-10熒光探針

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更新時(shí)間:2022-04-21 14:12:56瀏覽次數(shù):436

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1mg|5mg
貨號(hào) GOY-01X9742 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研 英文名稱 JC-10
JC-10熒光探針公司*的產(chǎn)品:KLK10 激肽釋放10抗體鄰苯二二辛酯 standard for GC, ≥99.5% (GC)
KLK14 激肽釋放14抗體俾斯麥棕R Biological stain
KMT6/EZH2 抑癌蛋白EZH2抗體俾斯麥棕Y Biological stain
K-ras 原癌因K-ras抗體3--4-氟苯 99%
KSR1 Ras信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)KSR1蛋白

詳細(xì)介紹

公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:

①細(xì)胞核,、染色體以及基因表達(dá)的研究,;

②生物膜與細(xì)胞器的研究;

③細(xì)胞骨架體系的研究,;

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控,;

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控,;

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡),;

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化,;

⑧細(xì)胞工程.

產(chǎn)品屬性:

中文名稱:JC-10熒光探針

英文名稱:JC-10

產(chǎn)品規(guī)格:1mg|5mg

發(fā)貨周期:1~3天

商品介紹:

JC-10是一種廣泛用于檢測(cè)線粒體膜電位△Ψm的理想熒光探針??梢詸z測(cè)細(xì)胞,、組織或純化的線粒體膜電位。在線粒體膜電位較高時(shí),,JC-10聚集在線粒體的基質(zhì)中,,形成聚合物,可以產(chǎn)生紅色熒光,;在線粒體膜電位較低時(shí),,JC-10不能聚集在線粒體的基質(zhì)中,此時(shí)JC-10為單體,,可以產(chǎn)生綠色熒光,。這樣就可以非常方便地通過熒光顏色的轉(zhuǎn)變來檢測(cè)線粒體膜電位的變化,。常用紅綠熒光的相對(duì)比例來衡量線粒體去極化的比例,。激發(fā)波長(zhǎng)Ex510nm,發(fā)射波長(zhǎng)Em525nm,。

線粒體膜電位的下降是細(xì)胞凋亡早期的一個(gè)標(biāo)志性事件,。通過JC-10從紅色熒光到綠色熒光的轉(zhuǎn)變可以很容易地檢測(cè)到細(xì)胞膜電位的下降,同時(shí)也可以用JC-10從紅色熒光到綠色熒光的轉(zhuǎn)變作為細(xì)胞凋亡早期的一個(gè)檢測(cè)指標(biāo),。JC-10單體的大激發(fā)波長(zhǎng)為515nm,,大發(fā)射波長(zhǎng)為529nm;JC-10聚合物的大激發(fā)波長(zhǎng)為585nm,,大發(fā)射波長(zhǎng)為590nm,。實(shí)際觀察時(shí),使用常規(guī)的觀察紅色熒光和綠色熒光的設(shè)置即可,。

儲(chǔ)存條件:-20℃干燥避光保存,,保質(zhì)期12個(gè)月。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1,、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大?。?/span>

2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;

3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化,;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;

5,、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;

二、免疫熒光鑒定:

1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min,;

3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h,;

6、用PBS沖洗3次,,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1,、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,,需根據(jù)細(xì)胞的大小,,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2,、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物,。

3,、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,,在37℃孵育4小時(shí),,使MTT 還原為甲臜,。

6、吸出上清液,,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻。

7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8,、結(jié)果分析

a,、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,,無細(xì)胞),,各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100

b,、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

氧芐啶(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ketorolac分子伴侶復(fù)合體TCP-1β抗體包裝1g

氧普(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Leflunomide分裂周期蛋白25C抗體包裝5g

異靛(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Leflunomide過敏C4/補(bǔ)體C4抗體包裝1g

間基酚(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Levofloxacin Hemihidrated脂肪結(jié)合蛋白3抗體包裝1g

間二酚(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Levofloxacin Hemihidrated16號(hào)染色體開放閱讀框48抗體包裝250mg

間酚(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Lornoxicam色P450 19抗體包裝25g

間羥基(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: LornoxicamCD28抗體包裝5g

交沙霉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Losartan Potassium1號(hào)染色體開放閱讀框195抗體包裝1ml

O(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Losartan PotassiumNK抑制性受體2DL1抗體包裝25ml

金橙II(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Masitinib3號(hào)染色體開放閱讀框67抗體包裝5ml

金剛烷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Mecillinamκ-酪蛋白抗體包裝1g

金諾芬(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Medroxyprogesterone 唾液結(jié)合性免疫球蛋白樣凝集7抗體包裝25g

伐倫克林(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Medroxyprogesterone Cappuccino蛋白抗體包裝5g

羅格列(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Methimazole前列腺過氧化物合成3抗體包裝1g

美托洛爾(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Methimazole補(bǔ)體因子H相關(guān)蛋白1抗體包裝250mg

無乳鏈球菌 蘭氏B群Streptococcus│agalactiae 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品腺病IgM試劑盒甜菊雙糖苷;Steviolbioside

條紋擬盤多毛孢Pestalotiopsis│virgatula 質(zhì)量規(guī)格:≥900μg/mg,USP33,BR腺病IgG試劑盒匙羹藤I;GyMneMic acid

韓國(guó)假單胞菌Pseudomonas│koreensis 質(zhì)量規(guī)格:效價(jià)測(cè)定腺病36抗體試劑盒脫氧;Deoxyaconitine
JC-10熒光探針米曲霉 4-溴-9,9'-螺二芴抗RA33IgG抗體Elisa

Bacillus tequilensis Nα-對(duì)甲苯磺酰-L-精氨酸半胱氨酸蛋白10Elisa

科氏葡萄球科氏亞種 2,2-雙(4-氧苯基)烷基質(zhì)金屬蛋白9Elisa

水生哈薩克斯坦酵母 5,6,7,7a-四氫噻吩并[3,2-c]吡啶-2(4H)-酮鹽酸鹽碳酸酐Elisa

美味牛肝 α-(4-基)二苯甲絲氨酸脫水Elisa

大腸埃希氏 利賽膦酸鈉抗膜聯(lián)蛋白A5抗體Elisa

爪哇根霉 N-Cbz-L-蛋氨酸抗磷脂酰乙抗體Elisa

鏈格孢 3-羥基-3-甲基-2-丁酮蛋白S抗體Elisa

枯草芽胞桿 3,4-二氟苯甲蛋白C抗體Elisa

囊毛霉 4-(二甲基氨基)苯酸鹽酸鹽抗波形蛋白抗體Elisa

枯草芽孢桿 4-溴-2-氟β2糖蛋白抗體Elisa

金白F4(金針菇) 4-溴-2-氟-芐泛化蛋白Elisa

美澳型核果褐腐病 Boc-L-2,4-二氯苯氨酸載脂蛋白FElisa

季也蒙邁耶氏酵母 N-(叔丁氧羰基)-3-氟-L-苯氨酸γ-谷氨?;D(zhuǎn)氨5Elisa

嗜熱脂肪芽胞桿 D-2,4-二氯苯氨酸烯酰水合1Elisa


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