CENP-E抑制劑(PF-2771)公司正在出售的產(chǎn)品：Anti-SCP2/NLTP/FITC 熒光素標(biāo)記固醇攜帶蛋白2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
AAT(Alpha-1Anti-tiypsin) α-1抗胰蛋白酶(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
多藥耐藥相關(guān)蛋白2抗體 Anti-MRP2 0.1ml
5HT4 R

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO),，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%,。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%,；二氧化碳,，5%。 溫度：37℃,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。

3）凍存液：90%血清,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存,。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍,，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

對(duì)于懸浮細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM,，常溫條件下離心5分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無(wú)菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,，500-1000g離心5min收集細(xì)胞,。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,，胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后,，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次,。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml,。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中,，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻,，室溫避光孵育15min,。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）,。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置,。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot）,，F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片,，顯微鏡下觀察,。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán),。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán),。
釀酒酵母Derxomyces anomala

反硝化芽生桿菌Bullera hubeiensis

短波單胞菌Bullera nakasei

金福菇Hannaella kunmingensis

平菇2000（京瑞）Bensingtonia changbaiensis

果生核盤(pán)菌Candida tibetensis

泡盛曲霉Saccharomyces cerevisiae

釀酒酵母Saccharomyces cerevisiae

根瘤菌Saccharomyces cerevisiae

橢孢小隔指孢Candida utilis

奧托氏菌屬Sporobolomyces roseus

平臍蠕孢菌Saccharomyces cerevisiae

佛雷德里克斯堡假單胞菌Saccharomyces cerevisiae

扣囊內(nèi)孢霉Saccharomyces cerevisiae

李色螺旋鏈霉菌Saccharomyces cerevisiae

類(lèi)芽胞桿菌Candida linzhiensis

小鼠骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)免疫試劑盒ADP核糖基化因子結(jié)合蛋白2抗體人抗Ku抗體(anti-Ku-Ab) 牛蒡苷元

小鼠骨成型蛋白9(BMP-9)免疫試劑盒精加壓受體2抗體人抗Ku抗體(anti-Ku-Ab) 牛蒡子苷

小鼠骨成型蛋白7(BMP-7)免疫試劑盒凋亡相關(guān)斑點(diǎn)樣蛋白ASC抗體人抗IgA抗體(anti-IgA-Ab) ?；悄戔c

小鼠骨成型蛋白4(BMP-4)免疫試劑盒絲狀肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白抗體人抗IgA抗體(anti-IgA-Ab) 牛磺鵝去氧膽
CENP-E抑制劑(PF-2771)SERPINB1 英文名稱(chēng)： 絲酸蛋白酶抑制劑B1抗體 0.2ml

phospho-EGFR (Ser695) 英文名稱(chēng)： 磷酸化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體 0.1ml

抑癌基因p16抗體 Anti-P16/CDKN2A 0.1ml

Anti-SOD2/FITC 熒光素超氧化物歧化酶2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-NIPA(Ser354) 磷酸化間變性淋巴瘤激酶核相互作用伴侶蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

CRF (Corticotropin-Releasing Factor) 促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg