EGFR抑制劑（PD153035）公司*的產(chǎn)品：Vcan/FITC 熒光標(biāo)記蛋白聚糖Versican抗體IgG
V.cholera Ogawa/FITC 熒光標(biāo)記01群稻葉型霍亂弧菌抗體IgG
V5 tag/FITC 熒光標(biāo)記V5 tag標(biāo)簽抗體IgG
V5 tag/HRP 辣根過(guò)氧化物標(biāo)記V5 tag標(biāo)簽抗體IgG
V.cholera Ogawa/FITC 熒光標(biāo)記01群小川型霍

公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核,、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究,；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控,；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控,；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化,；

⑧細(xì)胞工程.

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：EGFR抑制劑（PD153035）

英文名稱：PD153035

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg

發(fā)貨周期：1～3天

商品介紹：

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1,、無(wú)菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，最后將1mm3左右大?。?/span>

2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；

3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化,；

4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min,，棄去上清,，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5,、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；

二,、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min,；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min,；

4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜,；

5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h,；

6、用PBS沖洗3次,，每次10min,，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1,、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,，需根據(jù)細(xì)胞的大小,，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2,、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物,。

3、將96孔板在37℃,，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間,。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。

5,、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí),，使MTT 還原為甲臜,。

6、吸出上清液,，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,，用平板搖床搖勻。

7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片,，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8,、結(jié)果分析

a,、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,，無(wú)細(xì)胞）,，各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值,，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值,。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

側(cè)雄腐霉Lysinibacillus sphaericus大鼠胰島樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白4(IGFBP-4)

黃微綠鏈霉菌Lysinibacillus sphaericus大鼠胰島樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)

伊平屋橋大洋芽孢桿菌Lysinibacillus sphaericus大鼠胰島樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)

耐久腸球菌Lysinibacillus sphaericus大鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子D(VEGF-D)

金針菇Lysinibacillus sphaericus大鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子D(VEGF-D)

土地桿菌Lysinibacillus sphaericus大鼠胰島樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白2(IGFBP-2)

無(wú)環(huán)田頭菇Bacillus thuringiensis大鼠胰島樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白2(IGFBP-2)

殺結(jié)核鏈霉菌Lysinibacillus sphaericus大鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體1(VEGFR-1/Flt1)

松口蘑Lysinibacillus sphaericus大鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體1(VEGFR-1/Flt1)

大孢硬皮馬勃Lysinibacillus sphaericus大鼠胰島樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1(IGFBP-1)

固囊酵母Lysinibacillus sphaericus大鼠胰島樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1(IGFBP-1)

短桿菌屬Lysinibacillus sphaericus大鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2(VEGFR-2/Flk-1)

相思根瘤菌Lysinibacillus sphaericus大鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2(VEGFR-2/Flk-1)

空泡單胞菌Lysinibacillus sphaericus大鼠肝生長(zhǎng)因子(HGF)

灰樹花Lysinibacillus sphaericus大鼠肝生長(zhǎng)因子(HGF)

枯草芽孢桿菌Lysinibacillus sphaericus大鼠糖蛋白130(gp130)

轉(zhuǎn)錄因子相關(guān)蛋白TRRAP抗體代爾夫特菌豬肺炎支原體

微管相關(guān)蛋白α6抗體杰氏假單胞菌牛輪狀病毒

T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子TFEB抗體巨大芽胞桿菌早熟艾爾球蟲

轉(zhuǎn)錄延伸因子B2抗體類芽胞桿菌禽腺病毒(2型)
EGFR抑制劑（PD153035）金黃色葡萄球 牡荊鼠李糖苷

枯草芽孢桿 升麻-3-O-β-D-吡喃木糖苷

cc 998(雞腿菇) 仙鶴草B

櫟生青霉 馬錢苷酸

楊爛皮殼蕉孢 新二氫查爾酮

暗梗孢霉屬 白當(dāng)歸腦

杉葉散斑殼 商陸皂苷甲

大腸埃希 (R型)人參皂苷Rg2

香菇 莫諾苷

蘇云金芽孢桿 山茱萸苷

短桿 山茱萸新苷

假單胞 丁東莨菪堿

暗色環(huán)紋炭團(tuán) 細(xì)葉遠(yuǎn)志皂苷

籬邊粘褶 巴西蘇木

豬丹絲 麥冬皂苷D