公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核,、染色體以及基因表達(dá)的研究,;
②生物膜與細(xì)胞器的研究,;
③細(xì)胞骨架體系的研究,;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控,;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控,;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡),;
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化,;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:HCVRNA復(fù)制抑制劑(PSI-7977)
英文名稱:Sofosbuvir impurity M
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|1mg|5mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
Sofosbuvir impurity M是sofosbuvir的非對(duì)映異構(gòu)體,是sofosbuvir的雜質(zhì),。Sofosbuvir(PSI-7977)是HCVRNA復(fù)制的抑制劑,,表現(xiàn)出有效的抗丙型肝炎病毒活性。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號(hào):2095551-10-1 分子量:527.46 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用,。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1,、無(wú)菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化,;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5,、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二,、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h,;
6、用PBS沖洗3次,,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1,、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,,需根據(jù)細(xì)胞的大小,,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2,、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物,。
3、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間,。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。
5,、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),,使MTT 還原為甲臜,。
6、吸出上清液,,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻。
7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片),。
8、結(jié)果分析
a,、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),,各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD,。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值,。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
端羥基左旋聚乳(重均分子量206-288萬(wàn))英文名稱: Omeprazole Sodium Monohydrate神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3抗體包裝5g
端羥基左旋聚乳(重均分子量26-36萬(wàn))英文名稱: Dipivefrin hydrochlorideNEEP21蛋白抗體包裝100g
端羥基左旋聚乳(重均分子量3-5.5萬(wàn))英文名稱: Methylophiopogonone A磷化谷受體2B抗體包裝25g
端羥基左旋聚乳(重均分子量36-48萬(wàn))英文名稱: Penciclovir磷化谷受體2B抗體包裝100g
端羥基左旋聚乳(重均分子量48-73萬(wàn))英文名稱: BenazeprilatNADH氧化還原輔10抗體包裝25g
端羥基左旋聚乳(重均分子量5.5-9萬(wàn))英文名稱: Aceclofenac膜相關(guān)的蛋白質(zhì)HEM2抗體包裝500g
端羥基左旋聚乳(重均分子量73-102萬(wàn))英文名稱: TG-101209;TG 101209跨膜受體蛋白Notch-2抗體包裝100g
端羥基左旋聚乳(重均分子量9-17萬(wàn))英文名稱: Azasetron Hydrochloride磷化KB抑制蛋白β抗體包裝500g
端羧基聚(乳-羥基乙75/25)共聚物(重均分子量...英文名稱: Propranolol Hydrochloride磷化核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體包裝1g
端羧基聚(乳-羥基乙75/25)共聚物(重均分子量...英文名稱: Metadoxine泛樣蛋白NEDD8抗體包裝100g
端羧基聚(乳-羥基乙75/25)共聚物(重均分子量...英文名稱: D-Pyroglutamic acid核因子1C型抗體包裝25g
端羧基聚(乳-羥基乙75/25)共聚物(重均分子量...英文名稱: Isorhamnetin 3-sophoroside-7-rhamnoside磷化神經(jīng)正五聚體1抗體包裝5g
端羧基聚(乳-羥基乙75/25)共聚物(重均分子量...英文名稱: (-)-HolostyligoneRNA結(jié)合蛋白NOB1抗體包裝1g
端羧基聚(乳-羥基乙75/25)共聚物(重均分子量...英文名稱: 5-Carboxy-X- rhodamine; 5-ROX磷化T激活核轉(zhuǎn)錄因子4抗體包裝5g
端羧基聚(乳-羥基乙75/25)共聚物(重均分子量...英文名稱: Propylthiouracil膽汁受體抗體包裝1g
鐮孢Fusarium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>99%,USP基質(zhì)金屬蛋白組織抑制因子1試劑盒白樺脂;Betulinicaldehy
鞘單胞菌Sphingomonas│sp. 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定基質(zhì)金屬蛋白抑制因子4試劑盒;Phenylacetic aci
鹽生鹽古桿菌Halobacterium│halobuim 質(zhì)量規(guī)格:>900μg/mg,BR基質(zhì)金屬蛋白抑制因子3試劑盒α-菠甾-3-O-β-D-葡萄糖苷;α
HCVRNA復(fù)制抑制劑(PSI-7977)軸突蛋白1β/Neurexin 1β抗體左旋樟腦(標(biāo)準(zhǔn)品) Amfebutamone Hydrochloride
谷受體3A抗體端羥聚(乳-羥乙75/25)共聚物(重均分子量... rosiglitazone hydrochloride
谷受體3B抗體端羥聚乳乙共聚物50/50(重均分子量0.5-... BENZBROMARONE
谷受體3A+3B抗體端羥外消旋聚乳(重均分子量0.5-1.5萬(wàn)) Butenafine HCl
P53誘導(dǎo)凋亡抑制蛋白α抗體端羥外消旋聚乳(重均分子量1.5-3萬(wàn)) Tropisetron hydrochloride
胞質(zhì)5'核苷1A抗體端羥外消旋聚乳(重均分子量109-150萬(wàn)) Tropisetron hydrochloride
NOC2家族樣蛋白抗體端羥外消旋聚乳(重均分子量150-190萬(wàn)) Candesartan cilexetil
硝酪抗體端羥外消旋聚乳(重均分子量16-28萬(wàn)) Tamsulosin hydrochloride
核蛋白p8抗體端羥外消旋聚乳(重均分子量190-240萬(wàn)) N-(3-Chloro-ortho-tolyl) anthranilic acid