公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核,、染色體以及基因表達(dá)的研究,;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究,;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控,;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡),;
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化,;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:泛PI3K/mTOR激酶抑制劑(VS-5584)
英文名稱:VS-5584
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
VS-5584是一種泛PI3K/mTOR激酶抑制劑,抑制PI3Kα,,PI3Kαmt H1047,,PI3Kβ,PI3Kδ,,PI3Kγ和mTOR,,IC50分別為2.6nM,3.3nM,,21nM,,2.7nM,3nM和3.4nM,。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號(hào):1246560-33-7 別名:SB2343 純度:99.57% 分子量:354.41 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用,。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1,、無(wú)菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二,、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜,;
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h;
6,、用PBS沖洗3次,,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
操作規(guī)程
1,、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定),。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2,、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3,、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。
5,、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),,使MTT 還原為甲臜,。
6、吸出上清液,,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻。
7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8,、結(jié)果分析
a,、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,,無(wú)細(xì)胞),,各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b,、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
云芝栓孔菌(變色栓菌)成骨特異性轉(zhuǎn)錄因子(多肽)Anti-CCNB1IP1 AntibodyS100鈣結(jié)合蛋白A12(S100A12)
球孢白僵菌CREB結(jié)合蛋白抗原Anti-CCNB1IP1 AntibodyS100鈣結(jié)合蛋白A10(S100A10)
釀酒酵母染色盒同源物3抗原Anti-CCNE2 AntibodyS100鈣結(jié)合蛋白(S100)
*松乳菇CBX5(多肽)Anti-CCNE1 AntibodyR-脊椎蛋白4(RSPO4)
單孢霉克蛋白(Clara分泌蛋白)抗原Anti-CCNF AntibodyR-脊椎蛋白3(RSPO3)
解糖假蒼白桿菌CC趨化因子受體2/5抗原Anti-CCNT2 AntibodyR-脊椎蛋白2(RSPO2)
短波單胞菌屬嗜粒趨化蛋白CCL1抗原Anti-CCNL1 AntibodyR-脊椎蛋白1(RSPO1)
黑靈芝活化T表達(dá)和分泌的調(diào)節(jié)因子抗原Anti-CCR2 AntibodyRunt相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子2(RUNX2)
Olivibacter sitiensis巨噬炎性蛋白1β抗原Anti-CCT6A AntibodyRPE脊椎蛋白(RPESP)
解脂亞羅酵母巨噬炎性蛋白3α抗原Anti-CCRK AntibodyRopporin1蛋白(ROPN1)
錐形赤褶菇1-1單核趨化蛋白5抗原Anti-CCRL2 AntibodyRopporin1B蛋白(ROPN1B)
米根霉嗜粒趨化蛋白14抗原Anti-CCT7 AntibodyRNA聚合轉(zhuǎn)錄終止因子Ⅰ(TTF1)
豬丹絲菌嗜粒趨化蛋白22抗原Anti-CCZ1 AntibodyRNA結(jié)合基元蛋白38(RBM38)
托魯斯山鏈霉菌(公牛鏈霉菌)巨噬炎性蛋白19抗原Anti-CCT6A AntibodyRNA結(jié)合基元蛋白24(RBM24)
柄籃狀菌嗜粒趨化蛋白3抗原Anti-CD163L1 AntibodyRNA結(jié)合基元蛋白20(RBM20)
土棲假葡萄孢表面趨化因子受體1抗原Anti-CD180 AntibodyRNA甲基轉(zhuǎn)移(RNMT)
26S蛋白調(diào)節(jié)亞型S5a抗體敏捷食菌人唾液腺腫瘤細(xì)胞
泛激4抗體Pseudomonasluteola小鼠腎小管上皮細(xì)胞
泛激1抗體Thalassospirapermensis人肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞
泛激2抗體Maritimibacteralkaliphilus人宮頸癌細(xì)胞順鉑耐藥株
泛PI3K/mTOR激酶抑制劑(VS-5584)朱紅硫磺 13-Oxopodocarp-8(14)-en-18-oic a
肇州鏈霉 2--1,3-二甲基咪唑鎓四氟酸鹽
ATCC 33279 11Beta-羥基洋椿苦
Spirosoma 11R,12-Dihydroxyspirovetiv-1(10)
大腸埃希氏 11,12-De(methylenedioxy)danuphyl
富養(yǎng)羅爾斯通氏 10-Hydroxydihydroperaksine
豬丹絲 1,6,7-Trihydroxyxanthone
巨大芽孢桿 1,5,8-Trihydroxy-3-methoxy-2-pre
木紫芝 1,5,15-Tri-O-methylmorindol
根瘤 1,3-Dihydroxy-4-methoxy- 10-meth
科氏梭 1,3,5-Cadinatriene-3,8-diol
山丘鏈霉 1,4-二氫-1,2-二甲基-4-氧代-3-喹啉羧酸
英杜被孢霉 1,2,3,19-Tetrahydroxy-12-ursen-2
耐輻射奇球突變株 1,11b-Dihydro-11b-hydroxymaackia
李木層孔 (3S)-Hydrangenol 8-O-glucoside p