商品介紹:
SB1317是一種有效的CDK2,,JAK2和FLT3抑制劑,,IC50分別為13,73和56nM,。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:937270-47-8 別名:TG02 純度:98.54% 分子量:372.46 儲存條件:-20℃,,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:CDK2,,JAK2和FLT3抑制劑(SB1317)
英文名稱:SB1317
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核,、染色體以及基因表達(dá)的研究,;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究,;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控,;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡),;
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化,;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報告:
一、分離與培養(yǎng):
1,、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,;
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h;
6,、用PBS沖洗3次,,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
操作規(guī)程
1,、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個細(xì)胞,,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定),。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2,、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3,、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間,。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。
5,、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,,使MTT 還原為甲臜,。
6、吸出上清液,,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻。
7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8,、結(jié)果分析
a,、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,,無細(xì)胞),,各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b,、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
草螺菌屬 α-1 (-Thymosin alpha-1)Anti-CBFB AntibodySideroflexin3蛋白(SFXN3)
苔類芽孢桿菌半胱蛋白蛋白-12(多肽)Anti-Caspase-2 AntibodySideroflexin2蛋白(SFXN2)
斯高特白冬孢酵母半胱蛋白蛋白-12抗原(人)Anti-CBLC AntibodySideroflexin1蛋白(SFXN1)
漆柄小孔菌膠質(zhì)系源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(多肽)Anti-CBL AntibodyShootin1蛋白(Shootin1)
巨型艾耳球蟲人腫瘤壞死因子-α(多肽抗原)Anti-CBLN1 AntibodyShisa同源物5(SHISA5)
裂褶菌重組人腫瘤壞死因子Anti-CBLN1 AntibodySHC-轉(zhuǎn)化蛋白4(SHC4)
茶葉 聯(lián)菊酯,、死蜱 激受體相關(guān)蛋白Anti-CBLN2 AntibodySHC-轉(zhuǎn)化蛋白3(SHC3)
韓國梅奇酵母重組人白介-1受體拮抗劑Anti-CBLN3 AntibodySHC-轉(zhuǎn)化蛋白2(SHC2)
枯草芽胞桿菌DH 5 alpha 大腸桿菌菌體蛋白Anti-CCAR2 AntibodySHC-轉(zhuǎn)化蛋白1(SHC1)
大腸埃希氏菌甲狀腺運(yùn)載蛋白(抗原)Anti-CBR3 AntibodySestrin3蛋白(SESN3)
中慢生根瘤菌重組人表皮生長因子Anti-CBLN4 AntibodySestrin2蛋白(SESN2)
燼灰鏈霉菌神經(jīng)生長因子的一種(抗原)Anti-CBX4 AntibodySestrin1蛋白(SESN1)
土星擬威爾酵母subsufficiens變種神經(jīng)生長因子的一種(抗原)Anti-CCDC102A AntibodySesquipedalian1蛋白(Ses1)
細(xì)鏈格孢活化半胱蛋白蛋白-3抗原Anti-CCDC102A AntibodySerrate蛋白(SRRT)
葡萄座腔菌重組轉(zhuǎn)移GST標(biāo)簽蛋白Anti-CCDC102B AntibodySentan蛋白(SNTN)
硫色鐮刀菌半胱蛋白蛋白-4抗原Anti-CCDC102A AntibodySenataxin蛋白(SETX)
蛋白質(zhì)磷1B抗體PP2Cβ羅伊氏乳桿菌人心肌細(xì)胞
蛋白質(zhì)磷2調(diào)節(jié)亞基1A抗體惰性解油螺旋菌正常人皮膚黑色細(xì)胞
蛋白質(zhì)磷2調(diào)節(jié)亞基1B抗體糞腸球菌(糞鏈球菌)人低轉(zhuǎn)移肝癌細(xì)胞
蛋白質(zhì)磷2調(diào)節(jié)亞基3A抗體鮑曼不動桿菌人T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞
CDK2,JAK2和FLT3抑制劑(SB1317)嗜麥芽寡養(yǎng)單胞 3-Acetoxy-4-cadinen-8-one
黃硬皮馬勃 3-Acetoxy-24-hydroxydammara-20,2
靈芝 30-Hydroxylup-20(29)-en-3-one
擬威克酵母屬 3,4-Dihydro-3,4-dihydroxynaphtha
謝瓦曲霉 3',4',7-Trimethoxyflavan
尖孢鐮孢 3,22-Dihydroxyolean-12-en-29-oic
傳染性喉氣管炎病 3-(4-Hydroxy-3-methoxyphenyl)pro
大腸埃希 2β-Hydroxykolavelool
PET28a-EGFP 熒光蛋白大腸桿(綠色) 2'-O-Methylbroussonin C
無 2-Epitormentic acid
*蛹蟲草 29-Norcycloart-23-ene-3,25-diol
綠色木霉 28-Hydroxy-3-oxoolean-12-en-29-o
赭曲霉 25-Hydroxycycloart-23-en-3-one
清酒假絲酵母 22-Dehydroclerosteryl acetate
枯草芽孢桿 21αH-24-Norhopa-4(23),22(29)-die