拓?fù)洚悩?gòu)酶I抑制劑(9-Aminocamptothecin)公司*的產(chǎn)品：Anti-IGFBP-5/IBP5 /FITC 熒光素標(biāo)記胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白-5抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-PMSA/FOLH1/FITC 熒光素標(biāo)記前列腺特異膜抗原抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus an

商品介紹：

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：拓?fù)洚悩?gòu)酶I抑制劑(9-Aminocamptothecin)

英文名稱：9-Aminocamptothecin

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核,、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究,；

③細(xì)胞骨架體系的研究,；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控,；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡),；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實驗報告：

一,、分離與培養(yǎng)：

1,、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，最后將1mm3左右大小,；

2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s,，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s,，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化；

4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,，1200r/min 離心10min,，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；

5、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基,，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二,、免疫熒光鑒定：

1,、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,；

2,、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細(xì)胞30min,；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h,；

6,、用PBS沖洗3次，每次10min,，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。

操作規(guī)程

1,、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,，細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）,。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2,、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3,、將96孔板在37℃,，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,，在37℃孵育4小時,，使MTT 還原為甲臜。

6,、吸出上清液,，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻,。

7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）,。

8,、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT,，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD,。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值,。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100

b,、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

小鼠腫瘤壞死因子β(TNFβ)ELISA試劑盒 ，英文名： TNFβ ELISA Kit

犬肌紅蛋白(MYO/MB)ELISA檢測試劑盒CanineMyoglobin,MYO/MBELISAKit 96T/48T

犬腎上腺髓質(zhì)素(ADM)免疫試劑盒 Dog adrenomedullin,ADM ELISA Kit

英文名稱HumanapoB100ELISAKit人載脂蛋白B100(apoB100)規(guī)格：96T/48T

持久型ECL化學(xué)發(fā)光顯影試劑盒10次

Ratheatshockprotein90,hSP-90ELISA試劑盒大鼠熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠白介素17(IL-17)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Rat pigme epithelium derived factor (PEDF) ELISA Kit 大鼠色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA試劑盒

Humanpyridiniumcrosslink/PyriLinks,PYELISAKit 人吡啶交聯(lián)物(PY)ELISA試劑盒 96T/48T 分裝

Humancailageoligomericmaixprotein,COMPELISA試劑盒人軟骨寡聚基質(zhì)蛋白(COMP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

轉(zhuǎn)基因棉花GK19品系基因檢測試劑盒20次

humansnailhomolog2,SNAI2ELISAKit人蝸牛同源物2(SNAI2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

豬免疫球蛋白E(IgE)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human anapastic lymphoma kinase (ALK) ELISA Kit 人間變性淋巴瘤激酶(ALK)ELISA試劑盒

PorcinelisteriolysinELISAKit 豬單核細(xì)胞增多性李斯特菌素(listeriolysin)ELISA試劑盒 96T/48T 分裝

CLIAKitforAMPKELISAKit魚磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶規(guī)格：48T/96T

血液胱氨酸(cystine)含量比色法定量檢測試劑盒20次

PorcineAngiopoietin1,ANG-1ELISAKit豬血管生成素1(ANG-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
拓?fù)洚悩?gòu)酶I抑制劑(9-Aminocamptothecin)14-3-3 zeta+delta 英文名稱： 14-3-3 protein ζ/δ抗體 0.1ml

human Fibrinogen 英文名稱： 羊抗人纖維蛋白原抗體 0.1ml

基質(zhì)金屬蛋白酶-2抗體 Anti-MMP-2 0.1ml

Anti-S6PDH/FITC 熒光素標(biāo)記抗6-磷酸山梨醇脫氫酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-PDHA1(Ser293) 磷酸化丙酮酸脫氫酶α1抗體 規(guī)格 0.1ml

ShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin)-(Arg22) ?？窠?jīng)毒素(35肽)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1mg