RIP1WT S166磷酸化抑制劑(GSK481)公司正在出售的產(chǎn)品：Anti-Phospho-PDGF Receptor beta (Tyr1021)/FITC 熒光素標記磷酸化血小板源性生長因子受體-B抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rabbit Anti-mouse IgM/FITC 熒光素標記兔抗小鼠IgMMulti-class antibodie

商品介紹：

以下是細胞生物學試劑的詳細介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）,。

2) 對于懸浮細胞,，500-1000g離心5min收集細胞。

對于貼壁細胞,，要用不含EDTA的胰酶消化細胞,，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,，加入細胞培養(yǎng)液,，將細胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),，500-1000g離心5min收集細胞,。

3) 收集細胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,，離心收集細胞，共洗滌兩次,。

4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml,。

5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中,，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻,，室溫避光孵育15min,。

2. 樣品檢測

1) 流式細胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）,。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,，正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置,。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot）,，F(xiàn)ITC為橫坐標,，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,，活細胞僅有很低強度的背景熒光,，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光,。

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片,，顯微鏡下觀察,。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán),。喪失細胞膜完整性的細胞,，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán),。
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO),，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%,。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%,；二氧化碳,，5%。 溫度：37℃,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配,，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍,，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度,。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞,，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞,，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

銅綠假單胞菌Atopobium minutum

淺紫灰直絲鏈霉菌Bacillus altitudinis

根瘤菌Bacillus amyloliquefaciens

pCDH-CMV-MCS-EF1-CopGFP-T2A-puroBacillus barbaricus

大腸桿菌Bacillus cereus

黑傘屬Bacillus cereus

短芽孢桿菌Bacillus decolorationis

史氏芽孢桿菌Bacillus coagulans

鳥芽孢桿菌屬菌種Bacillus daliensis

枯草芽胞桿菌Bacillus gibsonii

異常漢遜酵母異常變種Bacillus firmus

蒼白堿線菌Bacillus halmapalus

枯草芽胞桿菌Bacillus ginsengi

香菇Bacillus ginsengi

pTrc99ABacillus halodurans

耐熱鹽土生古菌Bacillus halodurans

小鼠粘蛋白/粘液7(MUC7)免疫試劑盒α-輔肌動蛋白4(內(nèi)參)抗體人CD30分子(CD30)二氫麻醉椒苫

小鼠粘蛋白/粘液5B(MUC5B)免疫試劑盒堿性磷抗體人CD30分子(CD30)二氫歐山芹醋酯

小鼠粘蛋白/粘液5AC(MUC5AC) 免疫試劑盒AU1 tag標簽抗體人CXC趨化因子受體1(CXCR1)二氫歐山芹當歸酯

小鼠粘蛋白/粘液2(MUC2)免疫試劑盒脂肪增強結(jié)合蛋白1人CXC趨化因子受體1(CXCR1)二氫歐山芹
RIP1WT S166磷酸化抑制劑(GSK481)SRPK1 英文名稱： 絲酸/蘇酸蛋白激酶SRPK1抗體 0.2ml

Ephrin A3 英文名稱： 酪酸蛋白激酶A3受體抗體 0.1ml

富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白抗體 Anti-SPARC 0.2ml

Anti-TGF- BetaR 3/FITC 熒光素標記轉(zhuǎn)移生長因子–β受體3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-MAP4K4(Ser631) 磷酸化原活化蛋白激酶MAP4K4抗體 規(guī)格 0.1ml

ATF2 (Activating Transcription Factor2) 活化復(fù)制因子2(多肽)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg