詳細介紹
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究,;
②生物膜與細胞器的研究,;
③細胞骨架體系的研究,;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控,;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡),;
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
產品屬性:
中文名稱:突變型Cdk7抑制劑(1-NM-PP1)
英文名稱:1-NM-PP1
產品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
1-NM-PP1抑制突變型Cdk7,,IC50約為50nM,。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號:221244-14-0 別名:PP1 Analog II 純度:98.83% 分子量:331.41 儲存條件:-20℃,,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用,。 |
實驗報告:
一,、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化,;
4,、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,,1200r/min 離心10min,棄去上清,,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二,、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細胞2次,,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min,;
2,、PBS沖洗細胞2次,每次10min,,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3,、PBS沖洗細胞2次,,每次10min,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細胞30min,;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜,;
5、PBS沖洗細胞3次,,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h,;
6,、用PBS沖洗3次,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
操作規(guī)程
1,、在96孔板加入細胞100μL/孔,,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,,細胞增殖速度的快慢等決定),。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物,。
3,、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間,。
4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5,、每孔加50μL 1× MTT 溶液,,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜,。
6,、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻,。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片),。
8、結果分析
a,、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),,各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD,。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,,C 為對照細胞的OD 值,。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
雪腐微座孢胞內活化的Notch1蛋白抗體Human CD25(Interleukin 2 Receptor Alpha) ELISA Kit高分子量角蛋白(CK-HMW)
發(fā)酵乳桿菌神經鈣傳感蛋白1抗體Human CD32(Receptor II for the Fc Fragment of IgG) ELISA Kit高爾基體抗體(AGAA)
毛地黃殼針孢神經元鈣結合相關蛋白EFCBP1抗體Human GP4(Plaet Membrane Glycoprotein IV) ELISA Kit高爾基蛋白73(GP-73)
彎孢菌膜相關蛋白樣蛋白NUMBL抗體Human CCDC3(Coiled-coil domain-containing protein 3) ELISA Kit高半胱(Hcy)
匍匐曲霉原變種嘌呤霉敏感性肽蛋白抗體Human CD40L(Cluster of Differentiation 40 Ligand) ELISA Kit剛地弓形蟲(T.gondii)
金橙黃微小桿菌N-乙基順二酰亞敏感融合蛋白抗體Human CD80(T-lymphocyte activation antigen CD80) ELISA Kit干因子受體(SCFR)
芽孢桿菌NIPAL2蛋白抗體Human CD56(Neural Cell Adhesion Molecule) ELISA Kit干因子/肥大生長因子(SCF/MGF)
短波單胞菌屬神經營養(yǎng)因子HNT抗體Human CD13(Aminopeptidase N) ELISA Kit干生長因子(SCF)
青春雙歧桿菌軸突蛋白1β/Neurexin 1β抗體Human DLL1(Delta-like protein 1) ELISA Kit干擾誘導跨膜蛋白1(IFITM1/CD225/IFI17)
匍枝根霉原變種谷受體3A抗體Human E-Cad(E-Cadherin) ELISA Kit干擾誘導蛋白10(IP-10/CXCL10)
枯草芽孢桿菌谷受體3B抗體Human CRP(C-Reactive Protein) ELISA Kit干擾誘導T趨化因子(ITAC/CXCL11)
藤黃淺藤黃鏈霉菌谷受體3A+3B抗體Human CXCL10(Interferon Gamma Induced Protein 10kDa) ELISA Kit干擾調節(jié)因子8(IRF8)
雜色曲霉P53誘導凋亡抑制蛋白α抗體Human RAC1(Ras Related C3 Botulinum Toxin SubstRate 1) ELISA Kit干擾調節(jié)因子3(IRF3)
蘋果黑腐皮殼菌胞質5'核苷1A抗體Human EG-VEGF(Endocrine Gland Derived Vascular Endothelial Growth Factor) ELISA Kit干擾調節(jié)因子(IRF)
白地霉NOC2家族樣蛋白抗體Human PI3(Peptidase Inhibitor 3, Skin Derived) ELISA Kit干擾活化基因205(Ifi205)
溜曲霉硝基酪抗體Human GP4(Plaet Membrane Glycoprotein IV) ELISA Kit干擾a-抗體(Anti-IFN-ab)
盧森坦海旋菌Thalassospira│lucentensis 質量規(guī)格:>98%,,BR
魯氏不動桿菌Acinetobacter│lwoffii 質量規(guī)格:>99%,BR
ATCC22687=JCM1455=IFO10318=CCRC22069資源名稱: 膜醭畢赤酵母 質量規(guī)格:BR,羅氏進分
突變型Cdk7抑制劑(1-NM-PP1)肉色栓 半固體營養(yǎng)瓊脂低氧誘導因子-1αElisa
擬莖點霉屬 麥芽汁培養(yǎng)基對氧磷1Elisa
冬蟲夏草 雙料乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基多巴Elisa
莓實假單胞 遠藤氏瓊脂二氧化Elisa
豬丹絲 月桂基硫酸鹽蛋白胨肉湯-MUG肥大類胰蛋白Elisa
松杉靈芝 MFC肉湯肺表面活性物質相關蛋白AElisa
枯草芽孢桿 馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基肺表面活性物質相關蛋白BElisa
根瘤 馬鈴薯葡萄糖水肺表面活性物質相關蛋白CElisa
松鼠葡萄球 綜合馬鈴薯培養(yǎng)基肺表面活性物質相關蛋白DElisa
米曲霉 胰酪胨大豆多粘肉湯基礎分泌型球蛋白AElisa
綠色木霉 沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基(SDB)鈣蛋白Elisa
草假單胞 CIN培養(yǎng)基鈣調磷酸調節(jié)蛋白1Elisa
黑曲霉 波爾頓選擇性肉湯甘油三酯Elisa
貓埃菲比體 紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基肝化血漿總脂解Elisa
德爾布有孢酵母 乳糖蛋白胨培養(yǎng)液肝結合性表皮生長因子Elisa