詳細介紹
商品介紹:
Silibinin為抗癌和預防化合物,,能抑制細胞增殖和遷移,。 注:本品僅可用于科研實驗,,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號:22888-70-6 別名:Silybin;Silibinin A;Silymarin I 純度:98.0% 分子量:482.44 儲存條件:-20℃,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用,。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
Silibinin | 1mL(10mM)|100mg|500mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,,500-1000g離心5min收集細胞,。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,,胰酶消化時間不宜過長或過短,,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,,將細胞輕輕吹打下來,,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞,。
3) 收集細胞后,,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,,共洗滌兩次,。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,,使細胞濃度達到1×106 cell/ml,。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,,輕輕混勻,,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測),。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞,、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節(jié)去除光譜重疊和設定十字門的位置,。結果可用CellQuest等軟件進行分析,,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,,PI為縱坐標,。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光,。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察,。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI,。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán),。喪失細胞膜完整性的細胞,,細胞核顯示紅色,,膜上有綠色光環(huán),。
公司產品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%,;優(yōu)質胎牛血清,,10%,。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%,;二氧化碳,,5%。 溫度:37℃,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,,10%DMSO,,現用現配,,液氮儲存,。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細胞密度,。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng),。
對于懸浮細胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,,1000RPM,,常溫條件下離心5分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
多毛棒桿菌堿性磷(AP)標記的羊抗兔IgGAnti-SOX10 Antibody谷轉(ALT)
新月彎孢FITC標記的羊抗兔IgGAnti-SOX15 Antibody谷酰酰肽環(huán)轉移(QPCT)
異常畢赤酵母Cy7標記的羊抗兔IgGAnti-SOX2 Antibody谷酰2(GLS2)
天藍微紅鏈霉菌PE-CY5標記的羊抗兔IgGAnti-SOX3 Antibody谷酰(GLS)
枯草芽孢桿菌PE-Cy5.5標記的羊抗兔IgGAnti-SOX3 Antibody谷酰合成(GS)
孢囊放線菌PE-Cy7標記的羊抗兔IgGAnti-SOX3 Antibody谷酰果糖-6-磷轉2(GFPT2)
西唐氏鏈霉菌生物標記的羊抗雞IgGAnti-SOX4 Antibody谷脫羧樣蛋白1(GADL1)
棲熱菌Alexa Fluor 555標記的羊抗雞IgGAnti-SOX5 Antibody谷脫羧2(GAD2)
大腸桿菌PE-Cy5.5標記的羊抗雞IgGAnti-SOX6 Antibody谷脫羧1(GAD1)
山東戈登氏菌PE-Cy7標記的羊抗雞IgGAnti-SOX9 Antibody谷脫氫2(GLUD2)
馬爾他布魯氏菌Cy3標記的羊抗雞IgGAnti-SOX7 Antibody谷脫氫(GDH)
黎巴嫩鏈霉菌黎巴嫩亞種Cy5標記的羊抗雞IgGAnti-SOX9 Antibody谷受體相互作用蛋白1(GRIP1)
枯草芽孢桿菌Cy5.5標記的羊抗雞IgGAnti-SP3 Antibody谷豐富蛋白(GRP)
非洲哈茨木霉Cy7標記的羊抗雞IgGAnti-SP2 Antibody谷半胱連接(GCLM)
奇異變形菌PE標記的羊抗雞IgGAnti-SP1 Antibody谷肽(GluAP)
鹽城海桿菌PE-Cy3標記的羊抗雞IgGAnti-SP3 Antibody古梅斯蛋白2(AMZ2)
死亡結構域蛋白NRH2抗體紅色青霉大鼠腦靜脈血管內皮細胞提取物
神經絲蛋白抗體瘡皰桿菌大鼠腦靜脈血管平滑肌細胞提取物
巢蛋白NID2抗體解凝乳類芽胞桿菌大鼠腦成纖維細胞提取物
谷受體2C抗體動物雙歧桿菌大鼠腦動脈血管平滑肌細胞提取物
細胞增殖和遷移抑制劑(Silibinin)整齊格孢 β-羥丁酸脫氫
偏腫栓孔 酰基氧化
大腸埃希氏 槲皮3-O-蕓香糖苷
橫梗霉屬 亮氨酸脫氫
金灰青霉 甲基 3-O-阿魏??崴狨?/span>
地衣芽孢桿 硫酸酯
大腸埃希 甲基 5-O-阿魏酰奎尼酸酯
河流諾卡氏 α-L-巖藻糖苷
平菇—唐無孢 膽固氧化
解脂假絲酵母 脂蛋白脂
產黃青霉 甘油-3-磷酸氧化
釀酒酵母 膽紅氧化
新黑曲霉 精氨酸(牛肝)
假單胞 谷轉氨
貝氏節(jié)桿 泰樂霉