詳細介紹
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:FMS/KIT雙重抑制劑(PLX647)
英文名稱:PLX647
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
PLX647是FMS/KIT雙重抑制劑,IC50值分別為28和16nM。 注:本品僅可用于科研實驗,,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:873786-09-5 別名:PLX-647 分子量:382.38 儲存條件:-20℃,,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核,、染色體以及基因表達的研究,;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究,;
④細胞增殖及其調(diào)控,;
⑤細胞分化及其調(diào)控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡),;
⑦細胞的起源與進化,;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1,、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化,;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,,棄去上清,,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5,、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二,、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min,;
2、PBS沖洗細胞2次,,每次10min,,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3,、PBS沖洗細胞2次,每次10min,,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細胞30min;
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5,、PBS沖洗細胞3次,,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h,;
6,、用PBS沖洗3次,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
蘇云金芽孢桿菌蠟螟亞種Halobacterium salinarum大鼠C反應蛋白(CRP)
串珠鐮孢Alcaligenes faecalis subsp. faecalis大鼠組織多肽抗原(TPA)
白酒紅鏈霉菌Halobacterium salinarum大鼠組織多肽抗原(TPA)
大腸埃希菌Paenibacillus macerans大鼠組織型纖溶原激活劑(t-PA)
硫磺菌Azotobacter chroococcum大鼠組織型纖溶原激活劑(t-PA)
釀酒酵母Brevibacillus brevis大鼠組織因子(TF)
芬芳鐮刀菌Bordela bronchissptica大鼠組織因子(TF)
蠟狀芽孢桿菌Lactobacillus fructivorans大鼠維生D(VD)
假單胞菌屬Pediococcus acidilactici大鼠維生D(VD)
大腸桿菌Lactobacillus casei大鼠維生K1(VK1)
尖孢鐮孢Leuconostoc fallax大鼠維生K1(VK1)
植物乳桿菌Lactobacillus rhamnosus大鼠維生B12(VB12)
土曲霉Pediococcus pentosaceus大鼠維生B12(VB12)
粘質(zhì)沙雷氏菌Clostridium sporogenes大鼠維生D3(VD3)
蠟狀芽孢桿菌Lactobacillus zeae大鼠維生D3(VD3)
釀酒酵母Lactobacillus pentosus大鼠維生D2(VD2)
環(huán)指蛋白113A抗體蜜環(huán)菌(榛蘑)青霉屬菌
RAS癌基因相關蛋白RAB7抗體黃色白鬼傘溶血鏈球菌
RAS癌基因相關蛋白RAB6B抗體松塔牛肝菌絲核菌屬菌種
認知缺陷突觸相關蛋白SynGAP抗體擬鹿角靈芝頭狀鏈霉菌
FMS/KIT雙重抑制劑(PLX647)枯草芽孢桿 β-葡聚糖
類芽孢桿屬 紫蓳靈
白黃側(cè)耳 甲基葡萄糖
奇異球 異鼠李-3-O-新
類馬鏈球 塔格糖
果生鏈核盤 亥茅苷
蒂地盾殼霉 松二糖
黑曲霉 5-羥色酸
南印度站游動球 化矢車菊
釀酒酵母 L-來蘇糖
栗疫 矢車菊-3-O-葡萄糖苷
禾谷鐮刀 D-來蘇糖
高山節(jié)桿 肉堿
扁 N-乙酰-D-甘露糖
枯草芽孢桿 佛手柑內(nèi)酯
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2,、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物,。
3、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間,。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液,。
5,、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,,使MTT 還原為甲臜,。
6、吸出上清液,,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻。
7,、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8,、結(jié)果分析
a,、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,,無細胞),,各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,,T 為加藥細胞的OD 值,,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b,、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)