商品介紹：
SMI-16a是選擇性的Pim激酶抑制劑,，對Pim1,，Pim2和PC3細(xì)胞的IC50值分別為0.15，0.02和48μM,。
注：本品僅可用于科研實驗,，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！
CAS號：587852-28-6
別名：PIM1/2 Kinase Inhibitor VI
純度：98.0%
分子量：263.31
儲存條件：-20℃,，有效期2年,，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。

商品介紹：

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細(xì)胞,，500-1000g離心5min收集細(xì)胞,。

對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,，胰酶消化時間不宜過長或過短,，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時，加入細(xì)胞培養(yǎng)液,，將細(xì)胞輕輕吹打下來,，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),，500-1000g離心5min收集細(xì)胞,。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,，離心收集細(xì)胞,，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,，重懸細(xì)胞,，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中,，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,，輕輕混勻，室溫避光孵育15min,。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后,，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）,。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞,、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置,。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),，PI為縱坐標(biāo),。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察,。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI,。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色,，膜上有綠色光環(huán),。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37℃,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存,。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍,，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

對于懸浮細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM,，常溫條件下離心5分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

前動力蛋白2(PK2)ELISA Kit英文名稱：PK2 ELISA Kit周期依賴性激7抗體包裝1g

前蛋白轉(zhuǎn)化枯草溶菌9(PCSK9)ELISA Kit英文名稱：PCSK9 ELISA Kit周期依賴性激8抗體包裝25g

葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白4(GLUT4)ELISA Kit英文名稱：GLUT4 ELISA Kit周期蛋白依賴激抑制因子1C抗體包裝5g

葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白2(GLUT2)ELISA Kit英文名稱：GLUT2 ELISA KitⅡ型膠原α1蛋白/軟骨鈣抗體包裝1g

葡萄糖苷β(GUSβ)ELISA Kit英文名稱：GUSβ ELISA Kitc-fos抗體包裝25g

葡萄糖6磷異構(gòu)(GPI)ELISA Kit英文名稱：GPI ELISA Kit嗜鉻粒A抗體包裝5g

平滑肌肌動蛋白α2(ACTα2)ELISA Kit英文名稱：ACTα2 ELISA KitCGRP降鈣基因相關(guān)肽抗體包裝500mg

皮質(zhì)(CORT)ELISA Kit英文名稱：CORT ELISA KitChAT膽堿乙酰轉(zhuǎn)移抗體包裝1g

皮質(zhì)結(jié)合球蛋白(CBG)ELISA Kit英文名稱：CBG ELISA Kit周期蛋白N端結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體包裝5g

皮膚橋蛋白(DPT)ELISA Kit英文名稱：DPT ELISA Kit肌動蛋白結(jié)合蛋白CORO1A抗體包裝1g

旁血小板溶蛋白(PPL)ELISA Kit英文名稱：PPL ELISA Kit抗菌肽/天蠶抗體包裝5g

紐蛋白(VCL)ELISA Kit英文名稱：VCL ELISA Kit鈣/鈣調(diào)蛋白依賴蛋白激IG抗體包裝25g

牛血清白蛋白(BSA)ELISA Kit英文名稱：BSA ELISA Kit表面趨化因子受體8抗體包裝5g

Ⅻ(F12)ELISA Kit英文名稱：F12 ELISA Kit趨化樣因子超家族成員2抗體包裝250mg

ⅩⅢB肽(F13B)ELISA Kit英文名稱：F13B ELISA Kit胱硫γ裂解抗體包裝1g

炭疽芽胞桿菌Bacillus│anthracis 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6試劑盒植鋅;Zinc Phytate

假結(jié)核耶爾森氏菌Yersinia│pseudotuberculosis 質(zhì)量規(guī)格：>98% 腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子1試劑盒植鈉;Sodium phytate

擬諾卡氏菌Nocardiopsis│sp. 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98% ,標(biāo)準(zhǔn)品腫瘤壞死因子受體超家族成員18試劑盒植鈣;Calcium phytate
Pim激酶抑制劑(SMI-16a)糖轉(zhuǎn)移8結(jié)構(gòu)域1抗體姜黃（標(biāo)準(zhǔn)品） Fluazifop-P-butyl solution

環(huán)指蛋白27抗體姜（標(biāo)準(zhǔn)品）  Famoxadone solution

透明質(zhì)結(jié)合蛋白1抗體降二氫辣椒 Flufenoxuron

G蛋白偶聯(lián)受體激6抗體降香（標(biāo)準(zhǔn)品） Fomesafen

Rho GTP激活蛋白26抗體膠蒼術(shù)甙，羧蒼術(shù)苷二鹽(標(biāo)準(zhǔn)品) Flutolanil

G蛋白α抑制蛋白1抗體焦地黃乙甙A1 Flusilazole

生長停滯特異性蛋白6抗體焦地黃乙甙B1 Fipronil

谷胱甘肽合成抗體焦性沒食子（標(biāo)準(zhǔn)品） Fenobucarb

血型糖蛋白δ抗體絞股藍(lán)（標(biāo)準(zhǔn)品） Fenpyroximate